Budidaya virus di laboratorium dimungkinkan:

Budidaya virus dalam tubuh hewan laboratorium: hewan laboratorium terinfeksi dengan berbagai cara, bergantung pada tropisme virus terhadap jaringan tertentu. Misalnya, untuk budidaya virus neurotropik, infeksi dilakukan terutama di otak (virus rabies, ensefalitis tick-borne, dll.), budidaya virus pernapasan dilakukan melalui infeksi intranasal pada hewan (virus influenza), dermatotropik virus (virus cacar) - melalui infeksi kulit dan intradermal. Yang paling umum digunakan adalah infeksi kulit, intradermal, intramuskular, intraperitoneal dan intraserebral. Selama infeksi primer, hewan mungkin tidak sakit, jadi setelah 5-7 hari, hewan yang tampaknya sehat dikeluarkan dari percobaan, dan suspensi dibuat dari organnya, yang digunakan untuk menginfeksi hewan berikutnya.

Budidaya virus pada embrio ayam: Sebagian besar virus yang diketahui memiliki kemampuan untuk bereplikasi pada embrio ayam. Embrio yang digunakan berumur 8 hingga 14 hari, tergantung pada jenis virus, metode infeksi dan tujuan penelitian.

Budidaya virus dalam kultur jaringan: Kultur sel adalah suatu sistem sel yang diperoleh dari jaringan, terletak dalam bentuk lapisan sel yang menempel pada kaca, atau dalam bentuk suspensi.

Aplikasi yang paling praktis telah ditemukan dalam kultur lapisan tunggal dari garis sel primer yang tertripsinisasi dan kontinu.

Inti dari metode persiapan kultur jaringan primer adalah penghancuran jaringan antar sel dan pemisahan sel untuk produksi monolayer selanjutnya. Pemisahan sel dilakukan dengan memaparkan jaringan pada enzim proteolitik (tripsin).

Metode deteksi virus:

Netralisasi tindakan sitopatik (CPE);

Netralisasi reaksi hemadsorpsi;

Penghambatan reaksi hemaglutinasi;

Netralisasi pada hewan percobaan.

Serologis – untuk mendeteksi Abs spesifik dan Ags virus;

PCR (reaksi berantai polimerase) - metode ini didasarkan pada identifikasi fragmen DNA spesifik patogen dalam sampel uji dan prinsip replikasi DNA alami, termasuk pelepasan heliks ganda DNA, divergensi untaian DNA, dan penyelesaian komplementer keduanya. helai;

Mikroskop pendaran;

Metode uji warna.

Keterampilan praktis: tahapan pewarnaan Gram pada apusan, sifat apa yang dipelajari, interpretasi hasil

Langkah-langkah pewarnaan Gram:
- gentian violet (40 detik)
- Larutan Lugol - alkohol 96˚ (20-25 detik)
- mencuci dengan air
- magenta (2-3 menit)
- setetes minyak

Sifat tinctorial - kaitannya dengan pewarnaan Gram. Ada perbedaan antara Gram + (biru) dan Gram – (merah). Karena bingkai murein berlapis-lapis, Gram+ tidak punya waktu untuk berubah warna dengan alkohol dan dicat biru, dan Gram berubah warna dengan alkohol dan diwarnai merah dengan magenta .
№14

Metode dasar untuk mendiagnosis penyakit menular

1. Bakterioskopi (mikroskopi), viroskopi (mikroskopi elektron)

2. Bakteriologis (isolasi kultur murni).

4. Cara biologis (infeksi pada hewan).

5. Diagnostik virologi (isolasi virus dan racun):

A) efek sitopatik pada kultur sel (CPE);

B) reaksi untuk menetralisir efek mematikan pada hewan sensitif dan embrio ayam;

6. Diagnosis serologis (identifikasi menggunakan serum diagnostik imun):

A) reaksi aglutinasi ekstensif (RA);

B) reaksi aglutinasi indikatif (pelat);

B) reaksi hemaglutinasi tidak langsung (IRHA);

D) reaksi hemaglutinasi (HRA) dan reaksi hemadsorpsi (RGAds);

E) reaksi penghambatan hemaglutinasi (RTHA) dan hemadsorpsi (RTGAds);

7. Diagnostik imunologi (identifikasi antigen dan antibodi):

A) enzim immunoassay (ELISA);

B) reaksi imunoferritin;

B) reaksi pengendapan (RP):

D) imunobloting;

8. Metode diagnostik gen:

reaksi berantai polimerase (PCR) atau amplifikasi spesifik

9. Metode ekspres:

A) imunologis (MFA, RNTA, IFM);

B) bakterioskopik.

10. Diagnostik alergi:

A) Tes kulit dengan alergen tertentu (tularin, tuberculin, brucellin, disentri).

Wabah epidemi virus Ebola yang mematikan yang belum pernah terjadi sebelumnya di Afrika Barat, yang mengancam akan menyebar ke benua Eropa. AIDS, yang menghancurkan puluhan juta orang, dan penyakit-penyakit mengerikan lainnya yang sebelumnya tidak diketahui pada manusia, hewan, dan tumbuhan. Dimana mereka jatuh di kepala kita? Apa peran laboratorium rahasia CIA dan departemen militer AS dalam hal ini?

"Tidak mungkin! Kanker tidak menular! Semua ini palsu, seperti “teori konspirasi” atau pertemuan dengan orang Mars!” Beginilah tanggapan otoritas Amerika terhadap tuduhan pemerintah Venezuela bahwa pemimpin besar Revolusi Bolivarian, Hugo Chavez, dimusnahkan dengan cara menularkannya dengan virus kanker.

Namun, para ahli percaya bahwa sejumlah besar pemimpin Amerika Latin (dan pemimpin sayap kiri!) yang menderita kanker pada waktu yang hampir bersamaan tidak dapat dijelaskan oleh penyebab alami. Di antara mereka, bersama Chavez, adalah Presiden Argentina Néstor Kirchner, yang menggantikannya, Cristina Kirchner, Presiden Brasil I. Lula da Silva, yang berkuasa setelahnya, Dilma Rousseff, dan Presiden Paraguay Fernando Lugo (yang digulingkan pada masa pemerintahan Chavez). kudeta sayap kanan pada tahun 2012), diatur oleh CIA; dan tak lama kemudian didiagnosis menderita kanker sistem kekebalan). Pemimpin Kuba Fidel Castro nyaris tidak selamat dari kanker usus misterius yang menyerangnya setelah KTT Rakyat tahun 2006 di kota Cordoba, Argentina.

Hanya sedikit orang yang tahu bahwa jauh sebelum eksperimen brutal kamp konsentrasi di kamp kematian Jerman selama Perang Dunia Kedua, orang Amerika melakukan eksperimen serupa terhadap penduduk Amerika Latin di bawah naungan Institut Penelitian Medis Rockefeller.

Salah satu orang fanatik, Cornelius Rhodes, menulis kepada temannya pada tahun 1931: “Segala sesuatunya indah di sini di Puerto Riko, kecuali orang Puerto Riko. Tidak diragukan lagi, mereka adalah ras pencuri yang paling kotor dan paling malas di belahan bumi ini. Demi kesehatan masyarakat, diperlukan beberapa cara untuk menghancurkan semuanya. Dan saya melakukan segalanya untuk mempercepat proses ini - saya membunuh delapan orang selama percobaan, dan menginfeksi banyak orang dengan kanker. Tidak ada asuransi kesehatan atau tunjangan sosial di sini - hal ini dikagumi oleh para dokter yang bebas menyembuhkan dan menyiksa pasien mereka yang malang.”

Sang "Dokter" menyuntikkan zat biologis penyebab kanker secara intravena, dan setidaknya 13 pasien meninggal akibat eksperimen kejam tersebut.

Pada tahun 1950-an, Rhodes menjadi direktur program penelitian senjata kimia dan biologi di Fort Detrick Army Center di Maryland, lokasi uji coba di gurun Utah dan Terusan Panama, kemudian bergabung dengan Komisi Energi Amerika, yang membuat orang Amerika tidak menaruh curiga terhadap radiasi radioaktif. untuk menentukan tingkat “radiasi yang aman” dan terjadinya tumor ganas sebagai hasil percobaan tersebut.

Setelah kematian Rhodes, American Cancer Association memberikan penghargaan atas namanya. Namun, pada tahun 2004, setelah terungkapnya skandal eksperimen biadabnya, ketua asosiasi, S. Horwitz, mengumumkan bahwa penghargaan tertinggi untuk ahli onkologi AS tidak lagi dikaitkan dengan nama Rhodes karena “sifatnya yang kontroversial. aktivitasnya.”

Ada selusin bajingan sains di Amerika Serikat, dan mereka menguji hampir semua infeksi yang mereka temukan, pertama di Amerika Latin (tidak melupakan eksperimen pada warga negara mereka sendiri). Setelah perang, bidang ini menyempit karena banyak orang mulai meminta bantuan medis dan ilmiah dari Uni Soviet. Namun setelah runtuhnya Uni Soviet, prospek yang benar-benar tak terbatas terbuka bagi para flayer ini.

Obama telah beberapa kali dipaksa untuk meminta maaf kepada negara-negara Amerika Latin atas eksperimen terhadap orang-orang di usia 40-an dan 50-an, yang menyebabkan penyebaran sifilis dan penyakit menular seksual lainnya, infertilitas massal, dan berbagai epidemi. Namun, permintaan maaf seperti itu (hanya setelah publikasi bukti yang tak terbantahkan!) tidak akan menghidupkan kembali jutaan orang yang tewas dan menjadi korban bioterorisme AS, juga tidak akan menghentikan “eksperimen” semacam itu di masa depan (sesuai dengan prinsip “jika tidak tertangkap, tidak ada pencuri”).

Sejak akhir tahun 60an, percepatan pengembangan dan penciptaan berbagai modifikasi virus kanker dimulai. Pekerjaan ini dikoordinasikan dengan National Cancer Institute, yang secara resmi mengembangkan pengobatan untuk “penyakit abad ini,” dan secara tidak resmi berpartisipasi dalam proyek CIA untuk menggunakan virus kanker untuk tujuan militer dan politik.

Meskipun ada penandatanganan seremonial pada tahun 1972 di Moskow, London dan Washington tentang Konvensi Larangan Pengembangan, Produksi dan Penimbunan Senjata Bakteriologis (Biologis) dan Racun serta Penghancurannya (BTWC), pekerjaan di Fort Detrick tetap berjalan lancar dan pada tahun 1977 diproduksi 60 ribu liter virus karsinogenik dan imunosupresif.

Profesor R. Purcell, M. Hillerman, S. Kragman dan R. McCollum secara aktif berpartisipasi dalam penelitian ini, yang menggunakan “koktail” virus hepatitis B yang dikombinasikan dengan zat onkogenik untuk eksperimen tidak hanya pada kera rhesus dan simpanse, tetapi juga juga terhadap siswa Amerika dari Willowbrook State School for Mentally Retarded Children.
Pada tahun 1971, perusahaan farmasi Amerika Lytton Bionetics menandatangani kontrak dengan sejumlah negara Afrika untuk mempelajari pasien kanker dengan limfoma Birkett, terkait dengan oncovirus Epstein-Barr yang menular, serta leukemia dan sarkoma. Sangat mengherankan bahwa limfoma Birket pertama kali ditemukan di Uganda bagian barat setelah laboratorium Pusat Kanker Nasional AS, serta institusi medis lain yang disponsori oleh Rockefeller, bekerja di sana.

Salah satu ahlinya, R. King, mengatakan pada tahun 80-an bahwa spesialis dari Amerika Serikat menginfeksi orang dengan sarkoma untuk “mengisolasi genom virus melalui reklamasi, hibridisasi, rekombinasi virus, mutasi, dan teknik teknis lainnya.”

Dalam dengar pendapat Komite Gereja Senat pada tahun 1975, Dr. Charles Senseney, yang bekerja di laboratorium Fort Detrick, mengakui bahwa CIA menggunakan zat aktif biologis yang menyebabkan penyakit jantung dan kanker untuk menghancurkan angka-angka yang tidak diinginkan. Dia mendemonstrasikan sampel senjata yang digunakan untuk menginfeksi korban. Diantaranya adalah payung yang menembakkan miniatur anak panah ketika dibuka, serta sumpitan khusus untuk menembakkan jarum yang terbuat dari bahan beracun beku. Karena setebal rambut manusia dan panjangnya beberapa milimeter, jarum ini menembus kain pakaian tanpa kerusakan dan, ketika disuntikkan, menimbulkan sensasi nyeri yang tidak lebih buruk dari gigitan nyamuk, langsung larut di bawah kulit.

Di antara “produk baru” bioteroris Amerika juga diperlihatkan aerosol untuk menginfeksi “target” dengan penyakit mematikan setelah disemprotkan dari pesawat, serta “virus pelompat” yang menyebar melalui serangga (kutu, laba-laba, nyamuk) yang melompat atau terbang dari hewan yang terinfeksi. kepada manusia. CIA juga menjadi “pelopor” dalam metode penularan: melalui suntikan, inhalasi, kontak dengan kulit pakaian yang terkontaminasi, melalui sistem pencernaan melalui makan, minum, dan bahkan menggunakan pasta gigi.

Sejumlah ahli percaya bahwa salah satu pemimpin politik pertama yang tidak disukai Amerika Serikat yang terinfeksi senjata biologis kanker baru adalah Presiden Angola, Agostinho Neto. Dia meninggal di Rumah Sakit Klinik Pusat Moskow pada tahun 1979 pada usia 57 tahun karena penyakit kanker fulminan yang sampai sekarang tidak diketahui. Korban lainnya adalah mantan Presiden Chile, Eduardo Frey, yang terang-terangan menentang anak didik AS, Jenderal Pinochet. Frey meninggal di rumah sakit Santiago pada Januari 1982, tertular penyakit mematikan yang tidak diketahui setelah menjalani pemeriksaan kesehatan rutin.

Jadi, mungkin dalam 50 tahun arsip CIA akan dibuka rahasianya, dan rahasia kematian Hugo Chavez dan para pemimpin dunia lainnya akan terungkap. Ada begitu banyak dokumentasi tentang penggunaan virus kanker oleh badan intelijen Amerika sehingga keberadaan senjata tersebut tidak menimbulkan pertanyaan apapun. Satu-satunya pertanyaan adalah bagaimana hal itu “dibawa masuk” dan siapa pelaku langsungnya.

* * *

“Dalam 5-10 tahun ke depan, akan dimungkinkan terciptanya virus sintetik yang sama sekali tidak ada di alam, dan tidak dapat ditekan oleh sistem kekebalan tubuh manusia; virus baru yang diciptakan secara artifisial tidak akan dapat diakses oleh obat-obatan; tidak ada gunanya menggunakan cara konvensional untuk mengobati penyakit menular, antibiotik, vaksin, dan obat penawar untuk melawannya.” Pernyataan sensasional tersebut diungkapkan oleh kepala ahli virologi militer D. MacArthur, berbicara pada tahun 1969 di hadapan komisi Kongres AS (“Komisi Sykes”), yang seharusnya membuat rekomendasi mengenai alokasi dana anggaran untuk tentara. Dan dia meminta sedikit - hanya sekitar 10 juta dolar!

Uang dialokasikan dan ratusan peneliti dan ahli dilibatkan dalam pekerjaan ini. Salah satu pencipta virus AIDS rupanya adalah Dr. Robert Gallo, yang pada tahun 1987 bahkan menerima paten dari Departemen Kesehatan AS yang menetapkan prioritasnya dalam penemuan “virus yang menekan sistem kekebalan tubuh manusia”.

Penyakit ini lolos dari laboratorium dan pertama kali ditemukan pada musim semi tahun 1981 di California (AS). Dan hal ini tidak ada hubungannya (seperti yang coba diyakinkan oleh Amerika) dengan Afrika dan “monyet hijau kecil.”

Pada bulan Mei 1987, sebuah artikel muncul di London Times yang menyatakan bahwa vaksinasi cacar di Afrika (yang diprakarsai oleh "humanis" di Departemen Kesehatan AS) telah menyebabkan wabah AIDS. Dan jutaan orang telah divaksinasi! Kemudian “vaksinasi” serupa dilakukan di Haiti, Brazil dan negara lainnya.

Tuduhan terhadap Amerika Serikat yang memproduksi virus AIDS dimulai pada pertengahan tahun 80an. Profesor di Universitas Humboldt Berlin, Jakob Segal, berpendapat bahwa virus ini adalah "produk percobaan yang dilakukan di laboratorium dengan tujuan menciptakan senjata biologis." Di media AS, semua ini disajikan sebagai “propaganda Soviet.” Namun pada tahun 90an, Dr. Gallo sendiri mengumumkan bahwa ia telah menguji strain AIDS “alternatif” lainnya, yang dapat masuk ke dalam tubuh melalui sel epitel (yaitu, melalui kulit), sehingga meningkatkan risiko tertular penyakit melalui penyemprotan. zat aktif ke atmosfer.

S. Monteith adalah salah satu orang pertama yang, pada tahun 1981, menggambarkan potensi epidemi yang sangat besar dari virus baru ini, potensi konsekuensi bencana dari penggunaannya oleh “elit dunia”, dan juga membuktikan sifat buatannya.

Dan kualitas baru ini sejauh ini menghalangi segala upaya untuk menciptakan vaksin melawan AIDS. Itulah sebabnya selama bertahun-tahun belum ada satu pun obat yang efektif untuk melawan penyakit ini.

Jumlah orang yang terinfeksi AIDS masih belum diketahui, bahkan di Amerika Serikat pun pemerintah menghambat semua inisiatif yang bertujuan untuk menghitung perkiraan saja. Menurut berbagai perkiraan, 50 hingga 100 juta orang tertular AIDS. Yang terpenting di Afrika - di beberapa negara (Uganda, Kenya) lebih dari 50% penduduknya menderita penyakit mengerikan ini.

Dipercaya bahwa sekitar 40 juta orang telah meninggal karena AIDS hingga saat ini - jumlah yang hampir sama dengan jumlah kematian selama Perang Dunia Kedua!

* * *

Menurut Organisasi Kesehatan Dunia, lebih dari 600 orang yang terinfeksi Ebola telah meninggal di wilayah barat “benua gelap”.

Wabah penyakit ini saat ini telah menjadi yang terbesar dalam sejarah observasi medis.
Di Nigeria, Liberia, dan negara-negara Afrika lainnya, penjagaan khusus dipasang di perbatasan, dan dokter dengan cermat memantau semua orang yang masuk dan keluar. Demam Ebola dianggap sebagai penyakit mematikan yang paling rentan menyerang manusia, primata, dan babi. Tidak ada vaksin untuk itu.

Epidemi ini dimulai di Guinea pada bulan Maret tahun ini. Hingga saat ini, penyakit ini menyebar ke wilayah baru di Sierra Leone, Liberia dan Mali. Ada kekhawatiran penyakit ini tidak hanya menyebar ke seluruh Afrika Barat, tapi juga merambah ke Eropa.

Anehnya, di pusat epidemi, kasus serangan yang dilakukan warga lokal terhadap kantor organisasi internasional Doctors Without Borders meningkat tajam. Penduduk setempat menuduh dokter membawa virus tersebut ke wilayah tersebut. Telah terjadi demonstrasi besar-besaran terhadap pemerintah Afrika yang tidak melakukan apa pun untuk memperbaiki situasi.

Pogrom yang terjadi di kantor “organisasi internasional yang dihormati” disajikan oleh pers Barat sebagai contoh “irasionalitas dan absurditas.” Terlebih lagi, “Dokter Lintas Batas” menjunjung tinggi prinsip-prinsip etika mereka dengan segala cara, dengan memastikan bahwa mereka “selalu dekat dengan para korban.” Tapi bukankah mereka adalah korban mereka sendiri, seperti yang diyakini oleh orang-orang Afrika yang “tidak masuk akal”?

Mengapa dokter-dokter Barat dengan keras kepala menolak meninggalkan Guinea, Liberia, Mali dan Sierra Leone? Bagaimanapun, negara-negara ini sedang dilanda kekacauan perang saudara dan konflik, di mana negara-negara Eropa dan Amerika Serikat mengambil bagian aktif. Prancis sendiri telah menghabiskan ratusan juta euro untuk operasi militer di Mali.

Semuanya - untuk memulihkan kekuasaan kolonial di Afrika bagian barat dan utara. Dan wilayah inilah yang “dibersihkan” dari penduduk lokal selama epidemi Ebola dan penyakit menular lainnya. Terlebih lagi, yang mengejutkan, hanya penduduk lokal yang menderita, tetapi tidak “penjaga perdamaian” dari Perancis.

Dan “petugas medis tanpa batas” tidak memberikan obat-obatan dan peralatan kepada otoritas lokal dan tidak meninggalkan zona konflik. Hal inilah yang memberikan alasan kuat bagi penduduk setempat untuk mencurigai “aesculapian” asing bahwa merekalah yang menyebarkan jenis infeksi baru di antara orang-orang Afrika.

Menurut banyak ahli, senjata “etnis” baru sedang diuji di sana, yang bertindak selektif - hanya terhadap orang Afrika. Namun ternyata ada modifikasi untuk kelompok ras dan etnis lain. Pada tahun 2006, salah satu ahli virologi Amerika terkemuka Eric Pianka, berbicara pada pertemuan seremonial di Universitas Texas, mengatakan bahwa dengan bantuan jenis baru demam Ebola (dalam kata-katanya, “dengan tingkat kematian yang luar biasa”) hal ini mungkin terjadi. demi kepentingan planet ini” untuk mengurangi jumlah umat manusia sebesar 90%. Ahli virologi Amerika yang hadir di aula dengan suara bulat berdiri dan memberinya tepuk tangan meriah...

* * *

Sejak tahun 70-an, percepatan pengembangan “senjata etnis” telah dilakukan di Amerika Serikat. Dan seperti yang diyakini banyak ahli, kini telah ditemukan jenis virus mematikan baru yang hanya dapat menyebar di lingkungan etnis tertentu.

Dengan demikian, “SARS” mempengaruhi sebagian besar penduduk Tiongkok dan Asia Tenggara, Ebola dan AIDS - Afrika. Ilmuwan Israel sedang mencoba menciptakan senjata biologis serupa yang ditujukan untuk melawan orang-orang Arab.

Asosiasi Medis Inggris baru-baru ini menyatakan bahwa “perkembangan progresif dalam bidang genetika dapat menyebabkan pembersihan etnis dalam skala yang belum pernah terjadi sebelumnya di tahun-tahun mendatang.”

Gagasan untuk membangun “dominasi biologis atas dunia” tidak lagi matang tidak hanya di benak para ahli virologi kanibal yang gila, tetapi juga dalam perhitungan para politisi, ahli strategi militer, dan pakar! Oleh karena itu, gagasan ini baru-baru ini disuarakan oleh para politisi neokonservatif AS yang terhormat dalam laporan “New Frontiers for America’s Defense.”

Dikatakan bahwa, tentu saja, dominasi militer atas dunia pertama-tama harus dipastikan melalui rudal balistik dan jelajah, pesawat yang dikendalikan radio (“drone”) dan kapal selam, serta senjata satelit. Namun, seiring dengan ini, “dalam beberapa tahun mendatang, seni peperangan di udara, di darat, dan di laut akan sangat berbeda dari yang ada saat ini, dan pertempuran akan dilakukan dalam dimensi baru - di luar angkasa, di dunia maya, serta di dunia maya. seperti pada tingkat intraseluler dan mikroba." Dan lebih lanjut dikatakan bahwa “bentuk-bentuk senjata biologis yang canggih, yang akan memilih genotipe manusia tertentu sebagai target, akan mampu membawa arah dari dunia teror ini ke tempat yang tepat di antara cara-cara yang dapat dibenarkan secara politik”!

* * *

Pihak berwenang AS telah mengambil pelajaran dari Proyek Manhattan, khususnya transfer data senjata atom ke Uni Soviet oleh para fisikawan terkemuka dunia. Ilmuwan Amerika melakukan ini bukan demi uang, tetapi berdasarkan penilaian bijaksana terhadap pemerintah mereka, yang tidak akan ragu untuk mengebom Uni Soviet dan semua pesaing potensial lainnya dalam perjalanan menuju dominasi dunia.

Oleh karena itu, para pengembang virus baru kini tunduk pada aturan paling ketat untuk menghilangkan “saksi yang tidak diinginkan.” Angka kematian di antara mereka sepuluh kali lebih tinggi dibandingkan rata-rata statistik.

Pakar independen Amerika menghitung lebih dari seratus kematian “misterius” (dalam kecelakaan pesawat dan mobil, akibat penyakit yang “tidak diketahui”, “kecelakaan”) di antara ahli virologi dan mikrobiologi yang bekerja di bawah kontrak untuk CIA dan Departemen Pertahanan.

Pada tahun 2001, segera setelah ledakan “menara pancake”, seluruh orang Amerika dikejutkan oleh berita tentang surat-surat yang berisi spora antraks yang dikirim ke kantor editorial majalah, surat kabar, perusahaan TV, dan tokoh politik. 17 orang terinfeksi, lima meninggal. Surat-surat ini adalah alasan utama perubahan politik yang mengarahkan agresi AS terhadap Irak. Al-Qaeda semakin tidak dikenal, dan semua media melaporkan bahwa “serangan biologis terbesar dalam sejarah AS” diorganisir oleh Saddam Hussein.

Ketika perubahan ini diperkuat (dan kemudian digunakan untuk menuduh Hussein mengembangkan senjata biologis, yang menjadi salah satu argumen untuk invasi ke Irak), dengan cepat menjadi jelas bahwa jenis virus tersebut hanya dapat diperoleh dari laboratorium CIA di Fort. Detrik. Di sana mereka menemukan “mata rantai lemah” - ahli virologi Bruce Ivins, yang, sebagai seorang Katolik yang taat, sering mengeluh bahwa dia tidak menyukai karyanya karena alasan agama. Dan pada Juli 2008, dia diduga bunuh diri dengan menelan obat kuat. Setelah itu, FBI menyebut dia sebagai “teroris gila” yang mengirimkan surat berisi infeksi. Tidak ada otopsi yang dilakukan, tidak ada penyelidikan, dan kasus tersebut segera ditutup.

Menariknya, ia mengulangi nasib salah satu ahli mikrobiologi terkemuka tahun 50-an, Frank Olson, yang juga bekerja dengan antraks dan mengajukan pengunduran dirinya dari Fort Detrick, karena tidak ingin berpartisipasi dalam pengembangan senjata mematikan. Dan beberapa hari kemudian, pada bulan November 1953, menurut laporan FBI, “dalam keadaan gugup, dia melompat dari lantai 10 Hotel Pennsylvania.”

Salah satu kasus yang paling terkenal adalah “bunuh diri” ahli senjata biologis terbesar Inggris, David Kelly. Dia mengunjungi Irak puluhan kali sebagai bagian dari berbagai misi PBB untuk inspeksi. Setelah invasi, ia membuat pernyataan sensasional (pertama!) bahwa semua “dokumen” tentang keberadaan senjata kimia dan bakteriologis S. Hussein, yang disampaikan oleh otoritas AS dan Inggris di PBB dan menjadi dalih untuk perang. , adalah “palsu.” Dia dipanggil ke parlemen, di mana selama dengar pendapat dia pada dasarnya tidak diperbolehkan membuka mulut, menyerangnya dengan celaan dan tuduhan.

Beberapa hari kemudian, pada tanggal 17 Juli 2003, dia, seperti biasa, pergi jalan-jalan pagi, dan keesokan harinya tubuhnya ditemukan satu mil dari rumah. Laporan resmi menyatakan bahwa dia bunuh diri dengan menelan 30 obat tidur dan kemudian memotong pembuluh darah di pergelangan tangan kirinya dengan pisau. Tetapi dokter ambulans (tampaknya tidak mengetahui tentang “perintah”) mencatat bahwa tidak ada darah di bawah mayat. Akibatnya, Kelly meracuni dirinya sendiri, memotong pembuluh darahnya, dan kemudian, dengan pendarahan, dia sendiri sampai ke tempat dia ditemukan!

Di Amerika Serikat, salah satu peristiwa yang paling terkenal adalah kecelakaan pesawat pada bulan Maret 2002, yang menewaskan Stephen Mostow, ahli virologi terkemuka yang bekerja di Colorado Medical Center. Dia dipanggil "Tuan Flu" karena spesialisasinya pada penyakit ini.

Di antara korban tewas terdapat banyak orang dari negara kita yang, karena berbagai alasan, pergi “mencari kebahagiaan” di Barat. Yang paling mencolok adalah “serangan jantung” pada tahun 2001 pada ahli mikrobiologi V. Pasechnik, yang kesehatannya patut ditiru. Barat memanfaatkannya (seperti banyak orang Rusia lainnya) 200% - baik sebagai seorang spesialis maupun sebagai “pengungkap konspirasi mengerikan Kremlin terhadap Amerika Serikat dan seluruh dunia bebas.”

Pada tahun 1989, ia berangkat ke Inggris dan bekerja di sana di salah satu pusat virologi. Dalam perjalanannya, ia menghasilkan uang dengan bercerita tentang “senjata biologis biner” Soviet yang disebut “Novichok”, bahwa semua virus yang diketahui telah lama dikuasai di laboratorium rahasia KGB, dan virus baru telah muncul. Mereka dapat menyebabkan "penyakit mengerikan" seperti multiple sclerosis dan arthritis pada orang Amerika yang tidak menaruh curiga.

Kisah-kisah horor ini berguna karena memberikan alasan untuk mengeluarkan dana anggaran untuk “pertahanan hayati” (pada kenyataannya, untuk pengembangan jenis virus baru yang mematikan). Namun kemudian mereka memutuskan bahwa Pasechnik yang banyak bicara berbicara terlalu banyak tentang pusat virologi di Sailsbury, tempat dia bekerja selama 10 tahun, dan mengirimnya ke dunia lain...

* * *

“Roket Putin”, “tangan Moskow”, “Putin, kamu membunuh anakku!” - Majalah dan surat kabar Barat dipenuhi dengan berita utama seperti itu setelah sebuah pesawat penumpang Boeing yang terbang dari Belanda ke Melbourne ditembak jatuh di atas langit Ukraina pada 17 Juli tahun ini. Histeria ini dimulai segera setelah pidato Presiden AS Obama, yang mengatakan bahwa ini adalah “kejahatan dengan proporsi yang tidak terbayangkan” dan menyalahkan Rusia. Segera di tangan sekretaris pers Gedung Putih dan Departemen Luar Negeri, muncul beberapa foto buram yang diterima dari CIA dan “tidak dapat disangkal menunjukkan” bahwa pesawat itu ditembak jatuh oleh rudal Buk Rusia.

Peristiwa ini menjadi alasan penerapan sanksi ekonomi besar-besaran terhadap Rusia, keterlibatan negara-negara UE (sebelum bencana, mereka ragu-ragu apakah akan mendukung Amerika Serikat), penggunaan hampir semua cara perang yang dilarang untuk menekan perlawanan. di Novorossiya (termasuk bom fosfor, rudal balistik, hulu ledak cluster, dll.), implementasi rencana untuk membentuk blok militer anti-Rusia dengan partisipasi Ukraina, Moldova, Polandia, Georgia, dan negara-negara Baltik.

Hanya sebulan kemudian, mulai terlihat adanya lubang di kokpit dan badan pesawat yang membuktikan bahwa pesawat tersebut ditembak jatuh di udara, kemungkinan besar oleh pesawat tempur Angkatan Udara Ukraina. Versi ini dikonfirmasi oleh perubahan tajam pada rute Boeing sesaat sebelum bencana. Namun, tindakan tersebut telah dilakukan, semua media Barat segera melupakan pesawat tersebut, dan sanksi serta perang skala penuh terhadap rakyat Rusia di Ukraina timur tidak hanya berlaku, tetapi terus meningkat.

Ada semua tanda-tanda "peristiwa pemicu" atau "insiden yang dipalsukan" (insiden bendera palsu) - begitulah para ahli provokasi dari CIA menyebut serangan teroris yang dirancang untuk mengubah opini publik ke arah yang diperlukan bagi Amerika. Negara, untuk memulai rangkaian peristiwa yang akan mengarah pada realisasi tujuan “kerajaan”. Hal ini selalu terjadi dalam sejarah AS - ledakan kapal perangnya sendiri, Maine, yang menjadi dalih untuk menyatakan perang terhadap Spanyol pada tahun 1898; rencana tenggelamnya kapal uap penumpang Lusitania untuk memasuki momen yang menguntungkan dalam Perang Dunia Pertama; penindasan yang disengaja terhadap informasi tentang serangan Jepang yang akan datang terhadap pangkalan Amerika di Pearl Harbor pada tahun 1941 untuk memasuki Perang Dunia Kedua; provokasi dengan penembakan kapal perusak Amerika Maddox di Teluk Tonkin untuk menyatakan perang terhadap Vietnam pada tahun 1964; pemboman Menara Kembar pada tahun 2001 untuk memulai “Perang Melawan Teror” dan mempersiapkan invasi ke Irak dan Afghanistan.

Seperti yang sering terjadi dalam serangan teroris seperti itu, tidak hanya satu, tapi beberapa tujuan yang dikejar. Dalam hal ini, yang sangat menarik adalah informasi bahwa ada lebih dari seratus ahli mikrobiologi di dalam pesawat MH17 yang terbang ke kongres AIDS internasional di Australia. Dan di antaranya adalah J. Lange, ahli virologi terkemuka di Universitas Amsterdam.

“Kehilangan visioner dan raksasa terbesar dalam studi AIDS yang tidak dapat diperbaiki,” “kematian tragis ahli pengobatan penyakit terkemuka di dunia abad ini,” ditulis dalam berita kematian yang diterbitkan dalam jurnal ilmiah. Dan memang benar, laboratorium Lange mengambil posisi terdepan dalam studi AIDS dan metode pengobatannya, termasuk kombinasi penggunaan obat-obatan, terapi antiretroviral, dan mengembangkan cara untuk mencegah penularan virus dari ibu ke anak. Selama beberapa tahun (2002–2004) ia memimpin organisasi internasional untuk memerangi AIDS. Bersamanya ada rekannya dari Belanda Jacqueline van Tongeren, M. Adriana de Schutter, L. Vann Mens dan ilmuwan lainnya. Mungkin saja mereka membawa serta hasil kerja bertahun-tahun, bahkan mungkin obat yang telah lama ditunggu-tunggu untuk penyakit mengerikan ini - lagipula, sesaat sebelum konferensi, karyawan Lange mengatakan bahwa pidatonya harus menimbulkan sensasi di dunia ilmiah. .

Di Boeing yang sama (diduga, karena kebetulan yang menentukan), menerbangkan perwakilan Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), Glenn Thomas, yang “denda” karena memberikan wawancara di mana dia menyebutkan peran kriminal organisasinya dalam penyebaran penyakit. epidemi Ebola di Afrika Barat.

Dengan menghancurkan para peneliti AIDS Eropa, serta pejabat WHO yang jujur, Amerika memberikan pelajaran kepada semua orang yang dengan tulus melakukan upaya untuk menyembuhkan AIDS dan Ebola: “Tidak perlu mengobati dan mencegah penyakit-penyakit ini, penyakit-penyakit ini sangat berguna bagi kita. kami atas kehancuran umat manusia yang berkembang biak.”

Bukan suatu kebetulan jika sejumlah artikel mengingat bahwa pada tahun 1998, sebuah pesawat Swissair jatuh di atas Atlantik, membawa salah satu peneliti AIDS yang brilian, Jonathan Mann, dan istrinya M. L. Clements, yang juga seorang ahli virologi terkenal. Mann mengepalai struktur WHO yang dirancang untuk memerangi AIDS, dan, seperti yang ditulis rekan-rekannya, kematiannya merupakan pukulan telak bagi semua rencana untuk mengorganisir perjuangan melawan penyakit mengerikan ini. Penyebab bencana tersebut belum dapat diklarifikasi (tidak ada satupun ahli serius yang mempercayai versi resmi bahwa salah satu puntung rokok pilot jatuh dan menyebabkan kebakaran di bagian dalam pesawat).

* * *

Amerika Serikat menggunakan gudang senjata biologis yang sangat besar untuk melawan kita: GMO dan tanaman serta organisme transgenik (banyak di antaranya, menurut para ahli Barat, menyebabkan penekanan sistem kekebalan tubuh, kanker, infertilitas, dan penyakit otak), setiap tahunnya menyebabkan lusinan epidemi baru. virus influenza, penyakit hewan (“flu babi” dan “flu burung”), tumbuhan, menyebarkan berbagai penyakit alergi, menjual obat-obatan dan vaksin dengan “efek samping” yang tidak kita ketahui, bahan tambahan makanan, dll. Semakin banyak virus baru yang dikembangkan: “hantavirus” yang mematikan, “virus pembunuh Australia” rekombinan berdasarkan cacar, generasi baru penyakit “tidak fatal” (hanya benar-benar “melumpuhkan”), “bioregulator” yang mampu menciptakan depresi dalam skala besar, mengubah ritme jantung , dan menyebabkan insomnia. Ada kemungkinan bahwa “penanda” biologis dibuat - virus laten yang harus diaktifkan setelah waktu tertentu.

Laboratorium biologi militer Amerika sedang dibangun di sekitar Rusia: di Georgia (menurut para ahli, epidemi demam babi berasal pada tahun 2013), Kazakhstan, Kyrgyzstan, dan negara-negara Baltik. Pihak berwenang AS mengalokasikan sejumlah besar uang untuk pengembangan virus baru dan pertahanan biologis (lebih dari $6 miliar dihabiskan setiap tahunnya untuk program Bioshield saja).

Di negara kita, setelah runtuhnya Uni Soviet, untuk waktu yang lama hampir tidak ada perhatian yang diberikan pada bidang perlindungan negara yang paling penting ini. Institut dan pusat ditutup, spesialis muda berangkat ke Barat. Hanya tersisa ilmuwan peminat dan lanjut usia yang bekerja dengan gaji kecil (18 ribu adalah peneliti senior, 27 ribu adalah profesor, doktor sains).

Bangunan bobrok, peralatan ketinggalan jaman, “tekanan tambahan” dari pejabat liberal. Sampai-sampai pada tahun 2000, karena “kurang bayar”, Mosenergo dari Chubais mencoba mematikan listrik di Institut Virologi Ivanovsky. Tidak hanya kumpulan mikroorganisme unik yang akan dimusnahkan, tetapi beberapa sampel virus juga dapat lepas ke atmosfer! Maka hanya dengan keajaiban kita berhasil melawan “manajer yang efektif.” Dan pukulan terakhir diberikan oleh "reformasi" Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia - pada kenyataannya, likuidasi dan pengalihan manajemen ke tangan seorang akuntan "efektif" dari Krasnoyarsk.

Tidak ada yang mengganggu perburuan nyata agen CIA untuk ilmuwan patriotik, yang dihancurkan begitu saja di wilayah negara kita sendiri! Pada bulan Januari 2002, A. Brushlinsky, anggota yang sesuai dari Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia, direktur Institut Psikologi, psikolog dan ahli biologi, penulis karya tentang pengenalan teroris, dipukuli sampai mati dengan tongkat baseball (sehingga mereka tahu di mana perintahnya) untuk likuidasi berasal!) dan dicekik di pintu masuk rumahnya di Moskow. Dua tahun setelah kematiannya, wakilnya, Profesor V. Druzhinin, terbunuh.

Pada bulan November 2002, Profesor B. Svyatsky, seorang spesialis infeksi masa kanak-kanak dari Universitas Kedokteran Negeri Rusia dinamai demikian. Pirogov. Anggota yang sesuai dari Akademi Ilmu Kedokteran Rusia, ahli virologi dan mikrobiologi terkemuka, spesialis senjata biologis L. Strachunsky, dipukuli sampai mati dengan tongkat baseball pada tahun 2005 di kamarnya di Hotel Slavyanka Moskow. Pada tahun 2006, ahli genetika dan biologi, anggota Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia L. Korochkin terbunuh.

Kerugian besar bagi mikrobiologi dalam negeri adalah kematian kepala Departemen Mikrobiologi Universitas Kedokteran Negeri Rusia, Profesor V. Korshunov, salah satu ahli virologi terkemuka di dunia, seorang spesialis yang diakui dalam “anti-senjata” biologis. Ilmuwan berusia 56 tahun itu dipukuli sampai mati oleh “hooligan tak dikenal” pada tahun 2002, beberapa hari setelah penerbitan artikel surat kabar yang menyatakan bahwa ilmuwan tersebut berada di ambang penemuan terbesar - vaksin universal untuk melawan senjata biologis apa pun! Akibat kematian Korshunov, pekerjaan di bidang sains yang paling penting dihentikan. Ratusan, bahkan ribuan orang di Rusia ditakdirkan mati karena terhentinya penelitian.

Halaman-halaman tragis dalam sejarah modern meyakinkan kita bahwa Amerika Serikat mampu melakukan tindakan apa pun, tindakan paling biadab dan kriminal dalam keinginan besarnya untuk menguasai dunia. Sangatlah penting bahwa negara-negara yang mereka serang dengan dalih “melindungi hak asasi manusia”, “humanisme”, dan “demokrasi” tidak hanya menjadi tempat terjadinya perang saudara yang paling akut, tetapi juga disertai dengan epidemi berbagai penyakit baru yang sebelumnya terjadi. penyakit yang tidak diketahui. Banyak orang di Vietnam, Yugoslavia, dan Irak terpapar zat mutagenik, yang menimbulkan dampak buruk. Kelainan bentuk yang parah pada bayi, terciptanya seluruh generasi yang mengalami kemunduran, perubahan yang tidak dapat diubah pada tingkat genetik yang akan mempengaruhi semua generasi mendatang - ini adalah beberapa konsekuensi dari “tindakan kemanusiaan”.

Selain itu, organisasi-organisasi internasional, termasuk PBB, yang saat ini berada di bawah kendali penuh AS, memainkan peran “penutup” dalam pelaksanaan genosida ini. Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), Doctors Without Borders, dan badan-badan lain yang sebelumnya berwenang menulis “laporan objektif” mereka di bawah perintah Barat, dan mereka tidak lagi dapat dipercaya. Mereka bertindak bersama dengan para agresor di Irak, Afghanistan, dan Libya.

Menjelang invasi AS ke Irak, mereka dengan patuh menyimpulkan bahwa Saddam Hussein memiliki “persediaan senjata biologis dan kimia dalam jumlah besar,” yang menjadi salah satu argumen utama bagi AS untuk memulai perang. Tahun lalu mereka menuduh pemerintah Suriah menggunakan senjata kimia dan biologi terhadap rakyatnya ketika sekitar 300 orang terbunuh pada bulan Agustus oleh gas saraf sarin di pinggiran kota Damaskus. Meskipun pada saat itu telah diperoleh bukti kuat bahwa sarin digunakan oleh militan al-Qaeda, dan diperoleh bukan dari mana pun, melainkan dari gudang Amerika.

* * *

Penghancuran yang kejam terhadap para pesaing dan, pada kenyataannya, tirani biologis Amerika Serikat menghancurkan kedaulatan negara-negara pinggiran di dunia, memaksa mereka untuk bergantung pada bantuan, keahlian, dan obat-obatan dari luar negeri. Ketergantungan kolonial seperti ini melemahkan keamanan masyarakat, membuat mereka menjadi sandera Barat, “tikus laboratorium” untuk berbagai eksperimen medis dan biologi yang ditujukan terhadap kesehatan dan kehidupan mereka.

Satu-satunya penyeimbang terhadap kerajaan bioteror adalah penolakan terhadap “globalisme” yang kejam dan pembangunan dunia multipolar. Semua negara harus, selangkah demi selangkah, menolak kerja sama dengan Amerika Serikat dan NATO, organisasi internasional pro-Amerika yang ada. Penting untuk membuat perjanjian di tingkat antar negara bagian. Oleh karena itu, di Afrika, negara-negara harus bekerja sama untuk memerangi jenis baru Ebola yang masuk. Di Asia Tenggara - melawan sindrom baru yang paling akut yaitu “SARS”. Di tingkat nasional kita perlu menjaga ilmu pengetahuan kita, mendirikan lembaga dan laboratorium nasional kita sendiri, pusat ilmiah yang kuat untuk melawan senjata virus dan genetik.

Nikolay Ivanov

Suatu ketika, ada legenda di Fakultas Biologi bahwa di laboratorium tingkat keamanan ke-4 di Uni Soviet, dua “tabung reaksi” berisi penyakit menular yang berbahaya hilang. Mereka mencoba mencari orang yang bekerja dengan mereka, tapi dia pergi berlibur. Kepanikan terus bertambah dan mencapai puncaknya ketika direktur menerima telepon dari Yalta dan diberitahu bahwa kami memiliki jenazah karyawan Anda di sini, silakan datang untuknya. Jawaban sutradara singkat dan logis: "Kami tidak akan mendatangi Anda, dan Anda, tolong, jangan datang kepada kami juga." Mereka mengatakan bahwa dalam pikirannya dia memperkirakan jarak ke Yalta. Belakangan ternyata pegawai tersebut terburu-buru dan lupa mencatat bahwa sampelnya sudah dibuang, dan sayangnya dia tenggelam di Yalta. Wabah penyakit berbahaya dihentikan :) .

Namun tetap menarik untuk melihat seperti apa laboratorium tempat penyimpanan dan penelitian penyakit paling berbahaya. Dalam praktik internasional, ada 4 tingkat laboratorium untuk menangani patogen biologis. Kita semua pasti mengenal ikon Biohazard atau bahaya biologis.

Namun, apa yang tersimpan di baliknya tidak selalu berbahaya bagi kehidupan kita. Ini bisa berupa sel atau zat biologis apa pun yang berpotensi mempengaruhi organisme hidup. Percayalah, jika memang ada benda berbahaya yang bersembunyi di balik pintu, Anda tidak bisa masuk begitu saja.

Saya akan mulai secara berurutan. Yang paling sederhana dan tidak berbahaya adalah laboratorium tingkat 1. Mereka bekerja dengan kultur sel, virus dan bakteri, yang dianggap tidak menular. Mereka tidak boleh terpisah dari bangunan utama, dan pekerja menggunakan peralatan pelindung sederhana: gaun pelindung, sarung tangan, dan pelindung wajah sebagian.

Perlindungan tingkat 2 umumnya mirip dengan yang pertama, tetapi akses selama bekerja harus dibatasi, dan semua manipulasi dilakukan di ruang laminar khusus. Di laboratorium tersebut, mereka mempelajari infeksi yang menyebabkan penyakit ringan, serta infeksi yang pasti tidak ditularkan melalui tetesan udara. Misalnya, beberapa jenis hepatitis, jenis influenza yang umum, salmonella.

Di level 3 menjadi lebih menarik. Sudah ada pembatasan akses yang ketat, pintu masuk laboratorium memiliki pintu ganda dan ruang depan, hal ini memungkinkan Anda membatasi pertukaran udara antar ruangan. Ketika seseorang bekerja di laboratorium, orang lain tidak bisa memasukinya. Anda mungkin pernah melihat di film bahwa karyawan lain biasanya mengetuk pintu agar orang di dalam dapat membukakannya untuk mereka. Bukan berarti orang di luar tidak punya akses sama sekali, hanya saja pada saat penelitian tidak boleh ada yang masuk ke sana, sehingga mereka mengetuk, berusaha berpura-pura menjadi kucing Shrek agar diperbolehkan masuk. Semua pergerakan patogen diatur dan harus dilakukan hanya di ruang laminar khusus. Udara diolah dan tidak boleh tercampur dan masuk ke ventilasi bangunan induk. Karyawan mengenakan pakaian yang lebih banyak (sebagai aturan, wajah, kepala, dan lengan harus ditutup semaksimal mungkin, dan gaun tidak memiliki kancing di bagian depan, tetapi hanya dasi di bagian belakang). Sepulang kerja, pakaiannya sudah diproses, tapi tetap saja ini belum menjadi pakaian pelindung diri. Di laboratorium seperti itu kita sudah bisa menemukan penyakit mematikan yang sudah ada vaksinnya atau obatnya yang efektif. Misalnya demam kuning, virus West Nile dan patogen tuberkulosis.

Level 4 dirancang untuk bekerja dengan virus dan bakteri paling berbahaya dan menular yang belum ada pengobatannya. WHO menggambarkan desainnya sangat rumit dan oleh karena itu menghindari memberikan diagram apa pun. Saat ini, diagram tersebut terutama berisi berbagai jenis demam berdarah, termasuk virus Ebola dan Marburg. Di sinilah pakaian pelindung diri yang tertutup rapat dengan tekanan berlebih (sehingga manusia terlihat seperti mainan karet yang menggembung) sudah mulai bermunculan. Tekanan yang berlebihan diperlukan agar jika terjadi kerusakan, udara akan keluar dari pakaian dan mencegah udara dari laboratorium masuk ke dalam pakaian. Sebaliknya, di laboratorium itu sendiri, tekanan dipertahankan sedikit berkurang sehingga jika tekanan ruangan berkurang, udara tidak keluar.

Ada aturan tambahan dalam bekerja, misalnya di laboratorium seperti itu dilarang bekerja sendiri, kehadiran rekanan adalah wajib. Mulai dari laboratorium tingkat ketiga, setiap karyawan harus membawa kartu pengingat khusus yang menunjukkan nomor telepon orang yang harus dihubungi jika terjadi gejala yang mencurigakan, serta petunjuk untuk dokter yang merawat. Jika Anda memutuskan untuk berkomunikasi dengan seseorang di luar laboratorium, Anda harus menggunakan koneksi khusus untuk melakukan ini - sayangnya, Anda tidak dapat berteriak.

Mengganti pakaian adalah ritual di laboratorium dengan keamanan tinggi. Seperti di laboratorium level 3, semua pakaian dilepas seluruhnya dan setelah mandi, sesuatu seperti pakaian staf medis dikenakan. Salah satu detail lucu saat berganti pakaian terusan adalah merekatkan batas antara kaus kaki-celana dan sarung tangan-lengan dengan selotip; ngomong-ngomong, celananya dimasukkan ke dalam kaus kaki (Anda benar-benar bisa merasa seperti Batman). Setelah rekaman itu, pakaian yang disegel itu sendiri dipasang dan dihubungkan ke sumber udara. Dalam film-film yang memperlihatkan laboratorium semacam itu, kadang-kadang terlihat selang yang dipilin secara spiral membentang dari pakaian ke langit-langit, dan udara benar-benar masuk ke dalam pakaian melalui itu. Hal tersulit saat bekerja adalah jangan sampai tersangkut pada selang ini, seperti yang biasa terjadi pada penyedot debu yang tersambung ke jaringan. Namun akibat kesalahannya berbeda.

Untuk masuk ke laboratorium ini, Anda harus melewati ketujuh lingkaran neraka, tingkat perlindungan: banyak jiwa, ruang vakum, penyinaran ultraviolet, dan segala sesuatu yang dapat ditangani oleh imajinasi pengembang (ini adalah salah satu dari sedikit profesi yang mendorong paranoia ). Mereka mengatakan bahwa aerobatik adalah saat Anda harus menyelam di bawah tembok melalui kolam. Pakaian modern cukup nyaman untuk dimanipulasi, tetapi bagaimanapun juga, Anda perlu berlatih, karena tindakan sederhana seperti duduk di kursi dapat menimbulkan kesulitan - karena Anda kesulitan merasakan apa yang terjadi di sekitar Anda. Namun ada satu lagi ketidaknyamanan yang penting, sebelum memasuki laboratorium (dan, seperti yang Anda lihat, prosesnya tidak sesederhana itu), Anda perlu berpikir matang-matang, karena di tempat perlindungan tingkat 4 tidak ada toilet.. .jadi kamu harus bertahan sampai akhir percobaan :) (Mungkin lebih baik juga tidak minum air putih).

Setelah bekerja, Anda perlu mandi bahan kimia dengan pakaian Anda untuk menghancurkan semua sampel (mandi akan memakan waktu beberapa menit, jadi jika seseorang masih tidak bisa menahan diri untuk tidak minum air sebelumnya, maka menit-menit ini mungkin terasa seperti selamanya :) ). Selanjutnya mandi secara teratur dan berganti pakaian sipil.

Sebagai contoh laboratorium semacam itu, saya ingin mengutip infografis ilustrator Barat:

Rencana aksi untuk berbagai situasi darurat juga menarik. Misalnya, jika terjadi depresurisasi, zat mulai mengalir ke ventilasi, yang akan menonaktifkan patogen apa pun. Biasanya, ini adalah senyawa yang cukup agresif, seperti hidrogen peroksida dan formaldehida, sehingga bahan pembuat bangunan harus tahan terhadap senyawa tersebut (kayu dan wallpaper warna-warni tidak cocok di sini, tetapi solusi bergaya masih dapat ditemukan).

Karena alasan yang jelas, jurnalis dan simpatisan tidak diperbolehkan masuk ke laboratorium tersebut, sehingga hampir tidak mungkin untuk melihat laboratorium dari dalam. Namun, di Boston, sebelum dimulainya pengoperasian laboratorium tingkat 4 yang baru, mereka melakukan tur dan memberi tahu tindakan pencegahan apa yang diambil di dalamnya. Anda dapat melihat tur luar biasa ini di video, tetapi sayangnya, tur ini dalam bahasa Inggris.

Tidak banyak laboratorium level 4. Sejauh yang saya tahu, ada lima belas di antaranya di AS, dan di Rusia hanya ada satu, yaitu “Vektor” di Koltsovo (Novosibirsk). Keunikannya terletak pada kenyataan bahwa hanya dua laboratorium di dunia: Vector dan Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS yang menyimpan strain cacar. Pertanyaan tentang kehancuran total mereka muncul secara berkala, namun keputusan akhir belum dibuat.

Meskipun masyarakat takut terhadap virus dan bakteri, yang dipupuk dengan hati-hati oleh televisi, virus dan bakteri tersebut tidak seburuk yang diperkirakan orang. Ketakutan kita bukan lahir dari virus, tapi dari ketidaktahuan. Berapa banyak orang yang menolak untuk sekedar berkomunikasi dengan orang yang terinfeksi HIV, padahal itu benar-benar aman. Yang paling penting adalah mengikuti rekomendasi dan instruksi. Segala infeksi yang terjadi di laboratorium tersebut bukanlah akibat kesalahan sistem atau komputer, melainkan akibat kelalaian manusia. Oleh karena itu, bacalah dan dengarkan instruksi keselamatan dengan cermat, dan semuanya akan baik-baik saja bagi Anda :).

Siapa pun yang tertarik dengan topik ini dapat melihatnya :)

46. ​​​​Kultur sel dan jenisnya. Suatu sistem di mana sel, jaringan, atau organ yang dikeluarkan dari tubuh mempertahankan kelangsungan hidupnya setidaknya selama 24 jam. Bertahan: di mana sel hanya mempertahankan aktivitas kehidupan bawaannya tanpa bereproduksi. Tumbuh: mempertahankan aktivitas kehidupan bawaannya dan mampu berkembang biak. Menurut sifat pertumbuhannya, mereka dibagi menjadi 3 kelompok: suspensi; plasma (kultur potongan jaringan tetap); satu lapis. Yang berlapis tunggal dibagi menjadi 4 kelompok: tripsin primer; subkultur; semi-leapable dan interleavable. Penangguhan: tumbuh dalam bentuk suspensi, sel berkembang biak dengan media khusus ditambah pengadukan terus menerus menggunakan roller. Sel tumbuh di seluruh permukaan kasur. Sejumlah besar sel untuk vaksin. Plasma: potongan jaringan yang difiksasi oleh plasma, ini disebut kultur jaringan. Ini diperoleh dengan menempelkan sepotong jaringan pada kaca kaca virologi, kemudian menambahkan media lubang dan mengkulturnya; dalam hal ini, pertumbuhan sel dicatat di sepanjang pinggiran jaringan. Digunakan untuk mendapatkan potongan kain. Satu lapis: Untuk menunjukkan virus. Itu diperoleh dari jaringan atau organ dengan memperlakukannya dengan trypsin. Subkultur diperoleh dari subkultur primer dengan cara okulasi. Selanjutnya, semi-transplantasi dengan beberapa transplantasi. Mereka memiliki satu set kromosom diploid. Dapat bertahan hidup diploid tergantung pada umur atau jaringan tempat kultur sel diperoleh. Jika embrio sampai 80 hari. Untuk orang dewasa – tidak lebih dari 25 transplantasi. Yang lama tidak lebih dari 5. Yang ditransplantasikan adalah sel yang bermutasi dan bersifat kanker. Mereka bertahan berkali-kali tanpa batas. Ini adalah sel-sel tumor kanker yang diubah. Hela adalah kultur sel berkelanjutan yang paling terkenal sejak tahun 1956. Budaya ini hadir di semua laboratorium di dunia. Ini beradaptasi dengan banyak patogen. Hewan sulung memiliki sejumlah keunggulan: tidak mati; tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi; semuanya homogen secara genetis. Di laboptoria mereka dipelihara dengan cara disebarkan kembali dari satu wadah ke wadah lainnya.

59. BPD. Ini adalah metode untuk menunjukkan virus dalam kultur sel. CPD mengacu pada setiap perubahan sel dalam kultur sel di bawah pengaruh virus yang bereproduksi di dalamnya. Saya menggunakan perbesaran rendah saat melihat lapisan atas kasur. Bandingkan sel yang terinfeksi dengan sel yang tidak terinfeksi. Perbedaan mungkin meluas ke seluruh lapisan tunggal atau hanya di bagian tertentu saja. Mereka dihargai dalam krista atau poin. Jadi, jika seluruh monopoli CPU mengalami perubahan, diperkirakan 4 persilangan; jika ¾ - sebesar 3 cr; ½ kali 2 kr; ¼ - untuk 1 salib. Bentuk CPD bergantung pada sifat biologis virus, jenis sel, dosis infeksi, kondisi budidaya, dll. Beberapa virus menunjukkan CPD setelah 2–3 hari, yang lain setelah 1–2 hari. 3 bentuk CPU: fragmentasi– penghancuran sel menjadi fragmen terpisah, yang dipisahkan dari kaca dan masuk ke dalam cairan kultur. Pembulatan– sel kehilangan kemampuan untuk menempel pada kaca, mereka mengambil bentuk bulat, terpisah dan mengapung bebas di tempat mereka mati. Pembentukan simplast– pembubaran membran sel, akibatnya sitoplasma sel tetangga bergabung, membentuk satu kesatuan di mana inti sel berada. Formasi seperti itu disebut simplas - sel polifag raksasa. Setidaknya perlu dilakukan 3 kali pemeriksaan buta untuk menilai keberadaan virus dalam bahan uji. Hemadsoption adalah hubungan sel darah merah dengan permukaan sel yang terinfeksi virus.

51. Perhitungan titer virus menurut Reed dan Mench. Titrasi virus dengan efek yang dinilai secara statistik dengan perhitungan titer berdasarkan baca dan menu. Untuk metode titrasi ini, model biologis apa pun dapat digunakan, namun model ini harus peka terhadap virus yang dititrasi (kultur sel, embrio, hewan laboratorium). Menurut efek penularan dari model biologis yang terinfeksi, model tersebut dibagi menjadi berikut: diakui secara klinis; menurut perubahan patomorfologi; setelah kematian model; oleh akumulasi hemagglutinin. Hasil kerjanya tergantung pada dosis virus. Telah ditetapkan bahwa dosis virus yang menyebabkan 50 persen efek infeksi adalah dosis yang paling tidak rentan terhadap fluktuasi dan merupakan dosis yang paling dapat ditentukan dari semua dosis yang memungkinkan. Titer dinyatakan dalam dosis efektif 50 persen. Ini adalah ED 50. Tergantung pada model biologis yang digunakan dan efek yang diperoleh, dosis 50 persen dapat dinyatakan dalam satuan berikut: LD 50 – tanda pengenal 50 ELD 50 Idul Fitri 50 TsPD 50– ini adalah dosis sitopatogenik 50 persen yang ditentukan dalam kultur sel oleh CPD. Jika pada sistem yang terinfeksi kita tidak mengamati 50 persen efek ID 50, maka titer dihitung dengan membaca dan menu: lg LD 50 = lg ECD - (% tahun ECD - 50%) / (% tahun ECD - % tahun ECD) SEMUA INI DIKALIKAN DENGAN lg multiplisitas kali

36. Peraturan dan jam operasional di laboratorium virologi. Semua siswa diinstruksikan dan dilatih dalam tr yang aman. Dilarang masuk ke tempat produksi oleh orang yang tidak berwenang, serta masuk tanpa jubah dan sepatu pengganti. Dilarang keluar laboratorium dengan mengenakan jubah dan topi. Merokok, makan di laboratorium dan menyimpan makanan. Semua bahan yang masuk ke laboratorium harus dianggap terinfeksi. Di akhir pekerjaan, tempat kerja ditertibkan dan diidentifikasi secara menyeluruh. Pelabelan peralatan yang mengandung bahan infeksius. Tangan yang memakai sarung tangan dicuci dalam toples dengan larutan kloramida 5 persen, kemudian sarung tangan dilepas dan didesinfeksi untuk kedua kalinya, didesinfeksi dan dicuci. ra Pekerjaan ahli virologi di laboratorium didasarkan pada tiga prinsip utama: mencegah infeksi pada karyawan atau orang yang bekerja dengan bahan yang mengandung virus. Cegah kontaminasi bahan (alat, perkakas steril) dengan membersihkan ruangan dengan larutan desinfektan + lampu ultraviolet. Mencegah virus terbawa ke luar laboratorium (melalui udara, peralatan, bahan padat dan cair). Pipet dan gelas harus dibuang ke dalam alat sterilisasi. Tabung reaksi dengan virus, jaringan - ke dalam autoklaf. Jangan membuka centrifuge sampai berhenti. Anda hanya perlu mengeluarkan udara dari alat suntik menggunakan kapas yang diberi alkohol 75 persen. Ventilasi ruangan dilarang menggunakan sistem ventilasi dengan filter.

37. Tindakan pencegahan keselamatan dengan bahan yang mengandung virus. Mencegah penyebaran virus di lingkungan luar. Mencegah kontaminasi (kontaminasi) bahan yang mengandung virus dengan mikroflora asing. Pastikan keamanan pribadi. Untuk memenuhi persyaratan tersebut, diperlukan aturan kerja sebagai berikut: penuh perhatian dan rapi; hanya mengenakan jubah dan ganti di lemari; bekerja hanya dengan manset berkancing, topi dan masker kain kasa; menjaga kebersihan dan ketertiban laboratorium secara ketat; tidak boleh ada benda asing di desktop; Dilarang merokok dan makan. Gunakan instrumen dan peralatan yang steril. Bekerja dengan bejana di dekat nyala api pembakar. Jangan memasukkan jari Anda ke dalam mulut. Perangkat bekas di alat sterilisasi. Kumpulkan pipet bekas dalam wadah yang berisi larutan disinfektan. Kumpulkan limbah padat atau cair (kapas) dalam wadah khusus untuk disinfeksi selanjutnya. Jangan membuang sampah ke wastafel atau toilet.

33. Mekanisme kerja antivirus interferon. Interferon tidak mempunyai efek langsung terhadap virus. Ini hanya mempengaruhi sel dengan mengaktifkan sintesis enzim seluler tertentu. Khususnya, enzim protein kinase dan 2,5 oligoasintetase. Informasi tentang sintesis enzim ini juga terletak di wilayah tertentu pada gen sel dan juga berada dalam keadaan represif. Di bawah interaksi udara terjadi derepresi gen yang bertanggung jawab untuk sintesis protein kinase dan 2,5 iligoAs sintetase. Dan sintesisnya meningkat tajam. 1) di bawah udara protein kinase, faktor pemicunya adalah fosfor, yang memastikan pengikatan RNA pembawa pesan virus ke ribosom. Dengan demikian, RNA pembawa pesan virus tidak dapat menghubungi alat ribosom sel, yaitu awal penerjemahan. Dan pada akhirnya, sintesis protein dan enzim virus menjadi tidak mungkin. 2) di bawah pengaruh interferon, sintesis 2,5 oligoAsynthetase diaktifkan, yang mengkatalisis sintesis asam 2,5 oligoadenilat di dalam sel. Asam ini mengubah aksi nuklease seluler untuk menghancurkan RNA pembawa pesan virus. Jadi, di bawah pengaruh interferon, hal berikut terjadi: pemblokiran penerjemahan RNA pembawa pesan virus; penghancuran RNA pembawa pesan virus. Efek penghambatan interferon pada reproduksi sel: interferon dalam konsentrasi 0 hingga 1000 unit per ml menghambat reproduksi berbagai macam sel di jaringan mana pun. Interferon mengatur pertumbuhan berbagai jenis sel termasuk kultur sel primer dan sel tumor. Hal ini didasarkan pada penekanan sintesis protein seluler tertentu dan sintesis protein baru oleh interferon. Inter meningkatkan aktivitas mematikan limfosit T. Dalam dosis besar, mereka menghambat pembentukan antibodi. Sebaliknya, dosis kecil merangsang pembentukan antibodi. Krilling – sel yang diberi interf dosis kecil menghasilkan lebih banyak interf dibandingkan sel yang tidak diberi interf. Dosis yang terlalu besar adalah proses sebaliknya.

35. Jenis interaksi antara virus dan sel. Produktif dan gagal. Produktif dibagi menjadi litik dan laten. Produktif: Ini adalah jenis interaksi di mana generasi virion baru terbentuk di dalam sel. Jika sel cepat mati setelah memperoleh virion baru, maka ini adalah jalur interaksi litik yang produktif antara virus dan sel. Jika sel tempat virus tumbuh mempertahankan kelangsungan hidupnya (dengan bertunas) untuk waktu yang lama, maka ini adalah produk dari jenis interaksi laten. Gagal: Jenis ini bersifat mutual, ketika reproduksi virion berhenti pada tahap mana pun, virion tidak berkembang. Akibat interaksi virus dengan sel, perubahan berikut dapat terjadi pada sel: degenerasi sel– sel mula-mula berubah menjadi bentuk tidak beraturan, kemudian menjadi bulat, granularitas muncul di sitoplasma, kemudian fragmentasi inti, kemudian kematian sel. Perubahan seperti ini disebut CPD. Dalam persilangan: 4 persilangan – efisiensi 100%. Pembentukan simplas– sel berinti banyak. Pembentukan badan inklusi– mb intranuklear dan plasma, mengandung RNA atau DNA. Transformasi sel– virus onkogenik (retrovirus RNA). Reproduksi virus onkogenik dalam sel tidak disertai dengan CPD. Sel terus-menerus menghasilkan virus. Sintesis interferon.

4. Resistensi virus terhadap faktor fisikokimia. Resistensi virus hewan telah dipelajari dengan relatif baik ketika terkena faktor eksternal: suhu, radiasi, ultraviolet, ultrasound, pH, formaldehida, fenol, dll. Untuk melindungi dari pengaruh ini, virion memiliki cangkang protein. Perbedaan struktur dan komposisi kimia cangkang protein menentukan stabilitas virus yang bervariasi. Tergantung pada fitur-fitur ini, faktor yang sama dapat menghancurkan beberapa virion sepenuhnya dan tidak yang lainnya. Misalnya, pelarut organik: virion yang cangkangnya tidak mengandung lipid resisten terhadap zat ini, dan virion yang mengandung lipid cepat rusak. Inaktivasi virus berarti hilangnya sebagian atau seluruh aktivitas biologisnya, yang terjadi sebagai akibat dari faktor fisik dan kimia. Ketika asam nukleat dan protein virus berubah, terjadi inaktivasi total, yaitu hilangnya semua sifat biologis virus - ia hanya kehilangan sifat menularnya dan mempertahankan imunogenisitasnya. Sifat dan luasnya agen kimia dan fisik yang bekerja pada virus bergantung pada sifat faktor penonaktif, dosis, jangka waktu lama, jenis virus. Ketika virus dinonaktifkan, protein cangkang dapat dipecah, diikuti dengan disintegrasi menjadi unit-unit terpisah, atau pemadatan protein sambil mempertahankan struktur keseluruhan cangkang. Pembelahan diamati di bawah pengaruh lingkungan asam dan basa dengan pemanasan yang lama dan rendah.Koagulasi dan pemadatan terjadi ketika terkena formaldehida, suhu tinggi atau fenol. Tergantung pada konsentrasi dan durasi. Oleh karena itu, dalam beberapa kasus, koagulasi protein disertai dengan penghancuran asam nuklir dan virus mengalami hilangnya daya infektivitas yang tidak dapat diubah lagi. Dalam kasus lain, kemampuan virus untuk bereproduksi tetap terjaga. Diawetkan dengan gliserin.

60. PCR. Prinsip metode ini: gen spesifik untuk virus tertentu diidentifikasi - bagian dari molekul DNA yang membawa informasi untuk sintesis satu protein. Gen inilah yang kemudian diidentifikasi pada bahan uji menggunakan PCR. Reaksi ini memungkinkan pembentukan salinan gen tambahan - amplifikasi bagian DNA dalam tabung reaksi. Tergantung pada tujuan penelitian, spesies atau genus mo dapat diidentifikasi. Inti dari PCR: molekul DNA dipanaskan hingga 90-94 derajat. Yang menyebabkan rusaknya ikatan hidrogen antara basa nitrogen heliks ganda dan kemudian didinginkan hingga 52 g dengan adanya enzim DNA polimirase. Peningkatan laju selanjutnya mengarah pada sintesis molekul DNA baru - templat komplementer. Prosedur ini diulang berkali-kali, sehingga menghasilkan fragmen yang lebih besar. Indikasi dilakukan dengan menggunakan elektroforesis atau probe DNA berlabel. Komponen utama: DNA polimirase bersifat termostabil; oligonukleotida dari 20 nukleotida; trifosfat; amplifier, peralatan gelas dan reagen untuk elektroforesis pada gel agarosa. Setup: mendapatkan sampel DNA. Untuk melakukan ini, bahan uji disuspensikan dalam buffer atau air suling. Tambahkan natrium OH dan tahan selama 7 menit. Campurannya dinetralkan. Lisat disentifugasi selama 10 menit untuk mengendapkan partikel besar.Cairan supernatan digunakan untuk PCR. PCR adalah amplifikasi gen tertentu dari suatu fragmen DNA. Kemudian dicairkan dalam thermal cycler selama 3 jam. Indikasi amplifikasi - sampel dikenakan elektroforesis dalam gel agarosa untuk memisahkan DNA. Setelah 30 menit, agarosa dipolimisasi dalam peralatan dan lubang terbentuk di agarosa. Campuran diambil 10 μl dan dicampur dengan 5 μl pewarna. Campuran ditambahkan ke dalam sumur dan elektroforesis dilakukan selama 40 menit. Pelat diangkat dan diwarnai dalam larutan bromida selama 10 menit. Agarosa kemudian ditempatkan pada transilluminator dan pola pita yang dihasilkan difoto. Pita yang terlihat oleh radiasi ultraviolet adalah fragmen DNA.

49. Metode infeksi kultur sel. Indikasi virus dalam kultur sel. Infeksi: untuk tujuan ini, tabung dengan lapisan sel kontinu dipilih. Media pertumbuhan dikeringkan dan sel dicuci beberapa kali dengan larutan Hank. 0,2 - 0,1 ml bahan virus ditambahkan ke setiap tabung dan didistribusikan secara merata ke seluruh lapisan sel dengan cara dikocok. Dalam bentuk ini, tabung dibiarkan selama 1 hingga 2 jam pada suhu 22 atau 37 derajat untuk adsorpsi virus pada permukaan sel. Kemudian bahan virus dikeluarkan dari tabung reaksi dan media pemeliharaan dituangkan ke dalam tabung reaksi (1-2 ml). Setelah virus diisolasi, monolayer sel dicuci 2 kali dengan larutan Hank kemudian dituang media pendukung. Indikasi: menurut CPD; RGAd; dengan pembentukan plak; inklusi intraseluler; karang; mikroskop elektron

54.RTGA. RGB. RTGA: esensi– ketika virus dicampur dengan serum khusus, virus kehilangan sifat hemaglutinasinya. Sasaran– identifikasi vir yang diisolasi; deteksi antibodi dalam serum uji dan titernya. Komponen– untuk serovarian langsung: bahan yang mengandung virus, serum spesifik, suspensi sel darah merah 1%, larutan garam untuk pengenceran. Untuk retrospektif - uji serum, antigen standar dalam dosis tertentu 4 GAE (titer pengenceran virus) 4 GAE - 1:32. Skema– untuk setiap pengenceran serum tambahkan antigen standar (virus) dengan volume yang sama dengan dosis 4 GAE. Hubungi 30 menit pada suhu kamar. Untuk setiap sumur dengan pengenceran serum dan dosis virus yang konstan dalam 4 ha, tambahkan suspensi sel darah merah dengan volume yang sama. Hubungi 30-60 menit pada suhu kamar. Akuntansi reaksi dilakukan di krista. kalau plus berarti tidak ada aglutinasi, kalau menit berarti hemaglutinasi. Titer antibodi dalam serum uji adalah pengenceran serum maksimum yang sepenuhnya menunda aglutinasi sel darah merah.RGB: intinya: dalam adsorpsi virus pada permukaan sel darah merah, yang menyebabkan perekatan. Tujuan: indikasi; untuk titrasi virus di haen. Komponen: virus; 0,5 suspensi sel darah merah; larutan garam untuk persiapan. Skema pasca: siapkan pengenceran virus dua kali lipat; tambahkan suspensi sel darah merah 0,5% dengan volume yang sama untuk setiap perkembangan virus; hubungi 30-60 menit pada suhu kamar. Akuntansi: dalam kristal. 4 krista – aglutinasi 100%. 3 kristal - 75% . 1 salib – aglutinasi. 1 haen merupakan pengenceran maksimal virus yang dapat menyebabkan aglutinasi 50% sel darah merah.

57.ELISA. Intinya: ketika antigen + serum berlabel mengikat, enzim menguraikan substrat. Kompleks antigen+konjugat dibentuk untuk membentuk produk reaksi berwarna, dinilai di bawah mikroskop cahaya atau secara visual. Tujuan: identifikasi. Komponen: bahan soda virus, konjugat, substrat. Skema pengaturan: kulitra sel difiksasi dengan aseton dingin. Mereka dikeringkan dan konjugat diterapkan padanya. Inkubasi selama 1-2 jam pada suhu 37 derajat dalam ruang lembab. Cuci dengan larutan garam, bilas dengan air suling dan keringkan. Beberapa tetes larutan substrat dioleskan ke dalamnya, diinkubasi selama 5-10 menit, kemudian dicuci dengan larutan garam dan dibilas dengan air encer. Penghitungan: dalam hal ini, dengan adanya antigen, setelah penerapan konjugat, terbentuk kompleks antigen plus antibodi yang diberi label dengan enzim. Setelah penerapan substrat, substrat terurai oleh aksi enzim, membentuk produk berwarna yang terlihat jelas di mikroskop cahaya.

56. RSK. Intinya: pengikatan komplemen pada antigen plus kompleks antibodi. Tidak adanya pujian bebas dalam sistem ini dinilai dari retensi hemolisin dalam sistem indikator. Tujuan: identifikasi; deteksi antibodi dan titernya dalam serum darah uji. Komponen: 2 sistem – 1 (bahan yang mengandung virus; serum spesifik;) (serum uji; antigen standar). 2) sistem hemolitik (indikator) - 2-3% suspensi eritrosit domba merupakan antigen; hemolysin (serum hemolitik) adalah antibodi. Antibodi sesuai dengan antigen. Dan pujian hanya untuk 1 reaksi: jika yang pertama, maka akan terjadi penundaan hemolisis ketika pujian menghubungi sistem yang diteliti. Jika pada detik berikutnya sel darah merah mengalami lisis maka terjadilah hemolisis sempurna. Skema pengaturan: reaksi terlebih dahulu dilakukan pada sistem yang diteliti, kemudian sistem indikator ditambahkan pada tabung reaksi yang sama. Akuntansi: RSC positif – hemolisis tertunda. Negatif – hemolisis lengkap.

7. Protein virus. Terdiri dari asam amino. Komposisi protein virus bergantung pada urutan pergantian asam amino, urutan ini ditentukan oleh informasi genetik yang terkandung dalam genom virus. Protein virus dibagi menjadi struktural dan non-struktural. Protein struktural adalah bagian dari virion dewasa. Non-struktural b tidak termasuk dalam virion dewasa tetapi wajib pada tahap reproduksi tertentu. StrukturalTidak terstruktur

8. Enzim virus. Mereka pada dasarnya adalah protein. Mereka dapat dikaitkan langsung dengan virion, tetapi tidak terkait - tidak struktural. dalam DNA Untuk RNA: Polimirase DNA yang bergantung pada RNA - tidak ada di dalam sel, diperlukan untuk "-" yang mengandung RNA dan DNA, yang dalam keluarga vir retroviridae mengandung enzim yang mentransduksi genom virus yang disebut polimirase DNA yang bergantung pada RNA. Enzim ini memiliki nama: revertase, reverse transkriptase. Enzim yang terlibat dalam pembentukan protein virus: protease, protein kenase.

52.RN.Esensi: Ketika virus berinteraksi dengan serum tertentu, virus kehilangan sifat menularnya, kemampuan untuk berkembang biak di dalam sel. Sasaran: identifikasi virus yang diisolasi, deteksi antibodi dalam serum darah dan titer antibodi. Komponen: bahan yang mengandung virus, serum spesifik, model biologis. Jika retrospektif: tes serum darah, antigen standar, model biologis. Skema pengaturan umum: mencampur antigen dan antibodi, kontak selama 30-40 menit, maksimal 2 jam pada suhu 37-38 derajat; campuran antigen ditambah antibodi digunakan untuk menginfeksi model biologis; observasi dan akuntansi. Akuntansi: pH positif berarti hidup, pH negatif berarti mati.

53.RDP.Esensi: antigen dan antibodi yang sama ditempatkan pada jarak yang sama satu sama lain dalam gel agar berdifusi satu sama lain, membentuk endapan berupa garis putih pada titik pertemuan. Sasaran: identifikasi virus yang diisolasi, deteksi antibodi dalam serum uji. Komponen: bahan yang mengandung virus, serum spesifik, agar-gel. Untuk retrospektif: tes serum darah, antigen standar, agar gel. Skema pementasan: pelapis agar-agar disiapkan pada kaca objek, sumur disiapkan, komponen reaksi ditambahkan ke dalam sumur sesuai dengan skema tertentu, gelas dengan reaksi ditempatkan dalam termostat pada suhu 37-38 C. Reaksi dicatat setelah 48 jam. Reaksi positifnya adalah terbentuknya pita presipitasi berwarna putih.

55. RGAd, RTGAd. RGAd: Esensi: dalam adsorpsi eritrosit pada permukaan sel yang terinfeksi virus. Sasaran: indikasi virus. Komponen: kultur sel yang terinfeksi bahan yang mengandung virus; suspensi sel darah merah . Skema pementasan: pra-infeksi kultur sel satu lapis dengan bahan uji. Kultur dialirkan ke media kultur pendukung. Cuci dengan larutan Hanks. Suspensi sel darah merah ditambahkan. Hubungi 5-15 menit pada suhu kamar. Akuntansi: dilakukan di bawah mikroskop cahaya. Positif – sel darah merah teradsorpsi pada sel; negatif – sel darah merah mengapung bebas. RTGAd: inti: dalam pengikatan antibodi spesifik pada permukaan sel yang terinfeksi virus, yang menyebabkan terhambatnya adsorpsi pada sel eritrosit. Sasaran: identifikasi virus yang diisolasi. Komponen: kultur sel yang terkontaminasi; serum tertentu; suspensi sel darah merah. Skema pementasan: kultur sel satu lapis telah diinfeksi sebelumnya dengan bahan awal yang mengandung virus satu lapis. Tuang ke dalam media makan dan tambahkan 0,8 ml serum spesifik. Hubungi 20-30 menit. Suspensi sel darah merah ditambahkan. Kontak 5 – 15 menit. Akuntansi: Untuk kontrol, mereka harus menginstal RGA. Penghitungan dalam tabung percobaan: positif - sel darah merah mengapung bebas, negatif - sel darah merah juga mengapung bebas. Akuntansi dalam tabung kontrol dengan positif – adsorpsi, negatif – mengambang bebas.

6. Asam nukleat virus.+ RNA adalah asam nukleat virus yang juga memiliki fungsi RNA informatif. Informasi tentang sistem sintesis protein pada RNA+ segera ditransfer ke RNA genom tanpa transkripsi. -Virus yang mengandung RNA adalah virus dengan RNA beruntai tunggal yang tidak memiliki fungsi RNA pembawa pesan; pada virus tersebut, sintesis RNA pembawa pesan (transkripsi) terjadi pada templat dikurangi untaian RNA genom menggunakan enzim spesifik virus yang terkait erat. dengan gnome RNA, RNA polimirase yang bergantung pada RNA. Ada virus yang mengandung untai RNA plus dan minus, termasuk adenovirus dan paramyxovirus. Informasi genom dalam DNA untai ganda dikodekan pada kedua untai Asam nukleat diwakili oleh polinukleotida yang terdiri dari nukleotida individu. Jumlahnya dalam asam nukleat bervariasi. Setiap nukleotida terdiri dari 3 subunit: residu asam fosfat, karbohidrat, dan basa nitrogen.

9. Struktur virus. Bentuk dasar. Jenis simetri. Struktur: DNA: biasanya beruntai ganda, informasi gen dikodekan pada kedua untai. DNA virus dapat disusun secara linier dan melingkar. Bisa beruntai tunggal. RNA virus: seringkali beruntai tunggal, lebih jarang beruntai ganda. Tersusun linier, melingkar, terfragmentasi. Biasanya, mereka terdiri dari 11-12 fragmen. Vir RNA beruntai tunggal dapat terdiri dari dua jenis: untai plus dan RNA untai minus (genom negatif) Jenis simetri: lokasi subunit protein (kaposmer) menentukan jenis simetri virion - heliks, kubik, gabungan. Spiral Ini adalah jenis sim di mana kapsomer ditempatkan di sekitar asam nukleat secara heliks. Virus besar dan beberapa virus berukuran sedang memiliki sim jenis ini. Bentuk: berbentuk batang, berbentuk poli, bulat, lonjong. Pada virus berbentuk batang, kapsid terdiri dari kapsomer yang tersusun mengelilingi asam nukleat dalam bentuk spiral dengan diameter yang sama, berdekatan satu sama lain.Pada virus berbentuk bola, kapsomer tersusun dalam spiral tetapi diameternya berbeda. Tipe kubik: Sebagian besar virus berukuran kecil dan sebagian besar virus berukuran sedang mengidapnya. Bentuk virus tersebut adalah bulat. Kapsomer kapsid terletak di sekitar inti asam seperti di sekitar benda isometrik biasa. Cangkang protein dari virus tersebut mendekati bentuk icosaider, wajah biasa dengan 20 sisi. Gabungan jenis simetri: terdiri dari spiral dan kubik. Semua fag dan beberapa virus kompleks dari keluarga coxviridae memilikinya. Mereka memiliki cangkang luar berbentuk kubik dan cangkang kapsid spiral. Fag mempunyai kepala icoseindrical dan proses spiral.

18. Tahapan utama reproduksi virus tahap pertama. Ini adalah fase infeksi sel, selama fase ini virion harus menghubungi sel, menembus sel dan melepaskan pakaiannya. Pertama tahap adsorpsi virion pada permukaan sel dapat terjadi melalui dua cara: fisikokimia (nonspesifik); reseptor (spesifik). Jalur fisikokimia ditentukan oleh interaksi gaya elektrostatis permukaan yang timbul antara kelompok protein virus yang bermuatan positif dan gugus karboksin, sulfat, dan fosfat dinding sel yang bermuatan negatif. Reseptor berdasarkan interaksi spesifik reseptor protein virus dengan reseptor komplementer pada permukaan dinding sel. Reseptor virus dan reseptor sel yang sensitif terhadap virus tertentu memiliki konfigurasi yang saling melengkapi (seperti kunci gembok). Jika sel tidak sensitif, maka reabsorpsi tidak akan pernah terjadi. Kedua penetrasi – terjadi dengan cara yang berbeda untuk virus yang berbeda: dengan bantuan viropexys; dengan menggabungkan cangkangnya. Viropexis– jalur ini mirip dengan pinositosis. Mula-mula pada tempat adsorpsi pada permukaan sel terjadi invaginasi dinding sel membran, kemudian tepi membran menutup dengan bagian dalam sel, virion dengan seluruh membrannya muncul dalam vakuola sel. Oleh fusi- dalam hal ini, area selubung virus dan membran sel yang saling menerima dicairkan di bawah aksi enzim spesifik virus dan hanya asam nukleat virus yang muncul di dalam sel, sementara sisa-sisa virus dibangun ke dalam sel. amplop sel. Ketiga panggung– deprotenasi – pelepasan dari membran – bergantung pada jalur masuknya virus ke dalam sel. Jika deprotonisasi tidak diisolasi sebagai tahap terpisah melalui fusi membran, maka deprotonisasi terjadi bersamaan dengan penetrasi virus. Jika penetrasi dilakukan melalui viropexis, maka pelepasan asam nukleat virus dari selubung virus dimulai setelah penghancuran protein, lipid, dan lemak yang menyusun selubung virus. Semua tahapan bergantung pada suhu.

20. Transkripsi. Ini adalah penulisan ulang informasi genetik dari asam nukleat virus menjadi RNA informasi virus, yang baru disintesis sesuai dengan hukum kode genetik. (virus harus menyajikan protein ke sel yang sedang disintesis dan diubah menjadi RNA). Produk akhir transkripsi adalah viral messenger RNA. RNA + untai tunggal tidak memiliki transkrip, tetapi RNA virus genomnya memiliki informasi vir RNA. Dalam -RNA beruntai tunggal, genom tidak dapat menjalankan fungsi RNA pembawa pesan dan RNA-nya ditransfleksikan menggunakan enzim RNA polimirase yang bergantung pada RNA spesifik virus. MENGGAMBAR!

21. Siaran. Ini adalah proses menerjemahkan informasi genetik yang terkandung dalam RNA pembawa pesan virus menjadi rangkaian asam amino tertentu. Terjemahan terjadi ketika empat basa yang tertanam dalam RNA pembawa pesan virus diubah menjadi kode 20 asam amino. Produk akhir translasi adalah protein virus. Sintesis protein terjadi pada ribosom sel. Terdiri dari 3 fase: inisiasi penerjemahan dan awal penerjemahan; kelanjutan; penghentian – akhir siaran. Inisiasi didasarkan pada pembentukan kompleks komponen yang diperlukan untuk memulai translasi, yaitu kompleks inisiasi juga didasarkan pada pengenalan ribosom oleh RNA pembawa pesan virus dan pengikatannya pada area tertentu yang disebut penutup. Ini adalah guanin yang termetilasi. Setelah mengenali tutupnya, ribosom meluncur ke bawah molekul RNA pembawa pesan hingga mencapai tempat di mana penguraian kode informasi dimulai.

5. Komposisi kimia virus. Virus terdiri dari asam nukleat (DNA, RNA). Asam nukleat diwakili oleh polinukleotida yang terdiri dari individu non-nukleotida. Setiap nukleotida terdiri dari 3 subunit: residu asam fosfat, karbohidrat, dan basa nitrogen. Protein virus : Terdiri dari asam amino. Komposisi protein virus bergantung pada urutan pergantian asam amino, urutan ini ditentukan oleh informasi genetik yang terkandung dalam genom virus. Protein virus dibagi menjadi struktural dan non-struktural. Protein struktural adalah bagian dari virion dewasa. Non-struktural b tidak termasuk dalam virion dewasa tetapi wajib pada tahap reproduksi tertentu. Struktural Tergantung pada lokasinya di virion, protein virus dibagi menjadi beberapa kelompok berikut: protein kapsid - di kapsid; superkapsid b – dalam superkapsid (kebanyakan protein, ada juga lemak dan karbohidrat); protein matriks – protein lapisan membran; protein inti virus diwakili oleh enzim. Tidak terstruktur– bergantung pada fungsinya, mereka dibagi menjadi: pengatur ekspresi genom virus; penghambat biosintesis sel; penginduksi penghancuran sel; protein virus prekursor protein vir struktural; beberapa enzim virus bukan bagian dari virion dewasa. Lemak: terutama termasuk dalam bagian cangkang surercapsid virion dalam virus kompleks. Semuanya tidak dikodekan oleh genom vir dan berasal dari seluler. Mereka diwakili oleh fosfolipid dan glikolipid. Karbohidrat: adalah bagian dari superkapsid obol, tidak dikodekan oleh genom virus dan berasal dari seluler, diwakili oleh glikoprotein dan glikolipid . Enzim virus: Mereka pada dasarnya adalah protein. Mereka dapat dikaitkan langsung dengan virion, tetapi tidak terkait - tidak struktural. Enzim polimirase awal dan replika awal mengambil bagian dalam tahap perubahan informasi. Mereka diklasifikasikan sebagai penghambat biosintesis seluler. Enzim yang mentranshibisi genom virus: dalam DNA mengandung virus - polimirase RNA yang bergantung pada DNA terdapat di dalam sel; dalam beberapa kasus dapat diakses oleh virus, dalam kasus lain tidak. Ini bisa berasal dari seluler atau virus. Virus yang mengandung DNA yang berkembang biak di dalam nukleus berasal dari seluler. Di sitoplasma - asal virus - spesifik virus.

Untuk RNA: Polimirase DNA yang bergantung pada RNA - tidak ada di dalam sel, diperlukan untuk "-" yang mengandung RNA dan DNA, yang dalam keluarga vir retroviridae mengandung enzim yang mentransduksi genom virus yang disebut polimirase DNA yang bergantung pada RNA. Enzim ini memiliki nama: revertase, reverse transkriptase. Enzim yang terlibat dalam pembentukan protein virus: protease, protein kenase.

13. Bakteriofag. virus bakteri. Bakteriofag DNA dan RNA diketahui. Kebanyakan DNA fag beruntai ganda. Fag RNA beruntai tunggal. Asam nukleat fag dikelilingi oleh kapsid polihedral (kepala), yang pada banyak fag terdapat pelengkap (ekor). Diameter kepala kira-kira 60-95 nm dan panjang prosesnya 250 nm dengan ketebalan 10-25 nm. Proses tersebut berfungsi sebagai struktur perlekatan pada bakteri. Interaksi antara sel b dan mikroba merupakan proses biologis yang kompleks, yang hasilnya bergantung pada sifat fag dan dimanifestasikan oleh lisis sel bakteri. bakteriofag digunakan untuk diagnostik (antraks); untuk pengobatan infeksi bakteri; untuk pencegahan inf (salmonellosis). MENGGAMBAR!

22. Replikasi DNA virus.

23. Replikasi RNA virus. RNA untai tunggal dengan genom negatif:

25. Perakitan virion dan pelepasannya dari sel.

: ledakan, pecah, penghancuran sel tempat terbentuknya virion matang (virus sederhana), sel mati. Struktur kompleks muncul dengan cara bertunas, yaitu keluar melalui dinding sel dan bertunas. Dalam hal ini, sel tidak langsung mati, tetapi ketika cadangannya habis

19. Reproduksi tahap kedua.Tahap gerhana: tahap perubahan informasi. Pada tahap ini, fungsi genom seluler ditekan karena asam nukleat menghambat virus dan enzim virus menghambat peralatan genetik sel dan sistem sintesis sel. Hal ini menyebabkan sel berhenti mereproduksi komponen selulernya sendiri dan beralih ke mereproduksi komponen eksternal. Replika awal dan polimirase awal terlibat di sini. Transkripsi: Ini adalah penulisan ulang informasi genetik dari asam nukleat virus menjadi RNA informasi virus, yang baru disintesis sesuai dengan hukum kode genetik. (virus harus menyajikan protein ke sel yang sedang disintesis dan diubah menjadi RNA). Produk akhir transkripsi adalah viral messenger RNA. RNA + untai tunggal tidak memiliki transkrip, tetapi RNA virus genomnya memiliki informasi vir RNA. Dalam -RNA beruntai tunggal, genom tidak dapat menjalankan fungsi RNA pembawa pesan dan RNA-nya ditransfleksikan menggunakan enzim RNA polimirase yang bergantung pada RNA spesifik virus. MENGGAMBAR!Siaran: Ini adalah proses menerjemahkan informasi genetik yang terkandung dalam RNA pembawa pesan virus menjadi rangkaian asam amino tertentu. Terjemahan terjadi ketika empat basa yang tertanam dalam RNA pembawa pesan virus diubah menjadi kode 20 asam amino. Produk akhir translasi adalah protein virus. Sintesis protein terjadi pada ribosom sel. Terdiri dari 3 fase: inisiasi penerjemahan dan awal penerjemahan; kelanjutan; penghentian – akhir siaran. Inisiasi didasarkan pada pembentukan kompleks komponen yang diperlukan untuk memulai translasi, yaitu kompleks inisiasi juga didasarkan pada pengenalan ribosom oleh RNA pembawa pesan virus dan pengikatannya pada area tertentu yang disebut penutup. Ini adalah guanin yang termetilasi. Setelah mengenali tutupnya, ribosom meluncur ke bawah molekul RNA pembawa pesan hingga mencapai tempat di mana penguraian kode informasi dimulai. Replikasi DNA virus: Replikasi DNA beruntai ganda: Molekul DNA beruntai ganda mula-mula dipisahkan menjadi 2 untai terpisah menggunakan enzim nuklease seluler, kemudian DNA informasi virus dibentuk pada salah satu untai DNA virus yang menjadi matriksnya. Ini terjadi dengan bantuan enzim RNA polimirase yang bergantung pada DNA atau enzim spesifik virus. Kemudian RNA informasi virus berpindah ke ribosom sel dimana terjadi translasi dengan pembentukan protein dan enzim virus, termasuk enzim DNA polimirase. Menggunakan DNA polimirase, untai DNA komplementer kedua dibangun dari nukleotida sel. Dengan cara ini, molekul DNA untai ganda baru disintesis. Replikasi DNA beruntai tunggal: Untaian tunggal DNA mempunyai polaritas positif. Dengan bantuan enzim polimirase DNA yang bergantung pada DNA spesifik virus, untai DNA negatif komplementer terbentuk pada matriks DNA untai tunggal virus. Struktur heliks ganda disintesis, yang disebut bentuk replikasi. Kemudian, pada templat, untai minus dari bentuk replikasi membentuk untai plus DNA untai tunggal dengan menggantikan untai plus DNA dari bentuk replikasi. Replikasi RNA virus: RNA beruntai tunggal dengan genom negatif: Segera setelah penetrasi ke dalam sel, transkripsi terjadi dengan pembentukan virus inf RNA plus. Enzim RNA polimirase yang bergantung pada RNA spesifik virus terlibat dalam hal ini. Vir inf RNA kemudian diterjemahkan menjadi protein dan enzim RNA polimirase. Selanjutnya, dengan bantuan RNA polimirase, untai tunggal anak perempuan dikurangi untai RNA dibentuk pada matriks ditambah untaian RNA informasi. RNA untai tunggal dengan genom positif: Setelah penetrasi ke dalam sel, ditambah RNA segera berikatan dengan ribosom di mana ia diterjemahkan untuk membentuk protein dan enzim, termasuk enzim replikase RNA. Kemudian, di bawah aksi replikasi RNA, bentuk replikasi terbentuk. Pada templat, RNA minus dari bentuk replikasi menciptakan gambar untai RNA plus dengan memindahkannya dari bentuk replikasi. Replikasi RNA virus beruntai ganda: sintesis RNA virus pembawa pesan terjadi pada templat RNA untai ganda menggunakan enzim RNA polimirase yang bergantung pada RNA. Transkripsi pada templat untai RNA, setiap fragmen ditranskripsi secara terpisah. Kemudian ditranslasikan membentuk protein dan enzim RNA polimirase dengan bantuan enzim ini pada untai plus RNA pembawa pesan untuk membentuk untai RNA komplementer minus, yaitu RNA untai ganda. Perakitan virion dan pelepasannya dari sel: 2 strategi untuk perakitan, pematangan dan keluar dari sel yang terinfeksi: penerapan perakitan dan pematangan di dalam sel; kombinasi tahap terakhir perakitan virion dengan keluarnya sel yang terinfeksi.

Perakitan dilakukan dengan agregasi sederhana, yaitu kombinasi protein vir dengan asam nukleat terjadi di bawah pengaruh faktor fisikokimia, yaitu terjadi perakitan sendiri. Hal ini didasarkan pada penyatuan dan pengenalan asam non-protein dan protein-nukleat spesifik. Nukleokapsid terbentuk. Untuk virus sederhana, di sinilah proses perakitan mandiri berakhir. Pada virus yang kompleks, proses perakitan sendiri dilakukan secara berbeda. Sebagian protein menuju pembentukan nukleokapsid, yang terbentuk seperti pada virus sederhana, dan sebagian protein berpindah ke membran sel. Nukleokapsid yang terbentuk kemudian berpindah ke sana. Dan pembentukan cangkang superkapsid terjadi ketika virion meninggalkan sel, yaitu nukleokapsid ditutupi di atasnya dengan protein yang telah berpindah ke membran sel dan ketika lemak dan karbohidrat keluar dari sel, mereka dibangun ke dalam cangkang terluar ini. . Ada dua cara untuk keluar: ledakan, pecah, penghancuran sel tempat terbentuknya virion matang (virus sederhana), sel mati. Struktur kompleks muncul dengan cara bertunas, yaitu keluar melalui dinding sel dan bertunas. Dalam hal ini, sel tidak langsung mati, tetapi ketika cadangannya habis.

62-63. Cacar domba dan kambing(genus Caprippoxvirus). Ecthyma yang menular pada domba dan kambing(genus Parapoxvirus). Famili: poxviridae. mengandung DNA. Ciri-ciri reproduksi: genom virus sangat besar, bahkan pada sel yang terinfeksi, replikasi selesai setelah 6 jam. Penetrasi terjadi melalui fusi membran virus dan sel. Setelah penetrasi, DNA untai ganda dipecah dan replikasi dimulai pada kedua untai DNA sekaligus. Selain itu, sintesis komponen virus terjadi di sitoplasma sel. Perakitan virion di sitoplasma. Keluar dengan pemula.

2. Peran virus dalam patologi infeksi hewan. Saat ini, penyakit virus sangat penting dalam patologi infeksi hewan, manusia dan tumbuhan. Peran mereka meningkat seiring dengan pengurangan dan penghapusan penyakit bakteri, mikotik dan protozoa. Penyakit virus mencakup sekitar 80 persen di bidang kedokteran dan 50 persen di bidang kedokteran hewan. Ada lebih dari 500 penyakit yang diketahui disebabkan oleh virus. Asal virus telah ditemukan pada penyakit yang sangat berbahaya seperti penyakit mulut dan kuku, rinderpest, demam babi, dll. Virologi dapat dibagi menjadi umum dan khusus. Ilmu umum mempelajari sifat dan asal usul virus, klasifikasinya, struktur dan komposisi kimianya, genetika dan seleksi, metode diagnosis dan pencegahan, dasar-dasar kekebalan antivirus. Private vir mempelajari nama dan posisi sistematis patogen tertentu, struktur, ukuran, dan stabilitas virion, terapi, metode diagnostik, dan pencegahan.

1. Sejarah perkembangan. Periode pertama dimulai dari zaman dahulu hingga tahun 1892. Pada periode ini, virologi sebagai ilmu yang berdiri sendiri belum ada. Ahli bakteriologi mempelajari penyakit yang etiologinya tidak diketahui. Periode kedua - pembentukan virologi sebagai ilmu itu sendiri - meliputi tahun 1892-1950. periode ini dimulai dengan penemuan ahli botani Rusia D.I. Ivanovsky (1898) tentang filiabilitas agen penyebab penyakit mosaik tembakau. Ivanovsky, yang mempelajari etiologi penyakit tembakau, menemukan bahwa penyakit ini disebabkan oleh mikroorganisme kecil khusus yang melewati filter bakteri. Itu tidak terlihat di bawah mikroskop cahaya. Tidak tumbuh pada media pertumbuhan buatan. Selanjutnya, MO serupa diisolasi dari tumbuhan lain, serta dari hewan dan manusia. Mereka bersatu menjadi kelompok independen - ultravirus. Pada tahun 1930-an, embrio ayam mulai digunakan dalam praktik virologi. Pada tahun 1956, Stanley berhasil membagi virus menjadi komponen utamanya – protein dan asam nukleat. Pada akhir tahun 40-an abad ke-20, terciptanya mikro elektronik Rudenberg. Dan yang ringan diciptakan oleh Leeuwenhoek. Ilmuwan Soviet yang berkontribusi pada virologi: Zhdanov, Likhachev, Syurin.

48. Metode untuk memperoleh kultur sel trypsinized primer satu lapis. Sel satu lapis diperlukan untuk menunjukkan virus. Itu diperoleh dari jaringan atau organ dengan memperlakukannya dengan trypsin. Yang berlapis tunggal dibagi menjadi 4 kelompok: trypsinized primer; subkultur; diploid atau semi-cangkok; dicangkok. Jaringan dihancurkan dan disebarkan dengan enzim trypsin. Tripsin kemudian dihilangkan dengan sentrifugasi dan sejumlah media nutrisi cair ditambahkan ke sedimen yang dihasilkan. Sel-sel tersebut tumbuh dalam satu lapisan—satu lapisan—di permukaan bagian dalam kaca. Ada kebutuhan konstan akan organ dari hewan yang sehat. DAN embrio berumur 9-112 hari digunakan. Ovoskopi. Pemrosesan cangkang. Dengan menggunakan gunting, potong cangkang di atas tepi puga. Embrio dikeluarkan secara steril. Cuci dengan larutan Hank. Kantung kulit-otot telah disiapkan. Cuci dengan larutan Hank. Kainnya diparut dengan gunting. Pindahkan ke dalam labu trypsinisasi. Labu diletakkan di atas pengaduk magnet selama 15 menit. Suspensi didinginkan dalam bejana berisi es. Saring ke dalam labu penerima. Suspensi sel disentrifugasi selama 10-15 menit. Tripsin dihilangkan. Massa gabungan dibuat dari sedimen sel, dituangkan ke dalam tabung 1 ml dan sel dikultur.

47. Larutan basa dan media nutrisi.Berdasarkan asal Ada media pakan alami dan media pakan buatan. Alami - dari yang aktif secara biologis: embrionik, vitalitas alantoik ditambah penambahan larutan garam seimbang. Buatan - dibuat dari komponen individu. Paling sering, media makan universal digunakan, atau mungkin ada yang khusus. Universal adalah medium 199 dan medium Igla. Komposisi media seni harus mencakup asam amino, vitamin, enzim dan larutan garam seimbang, kadang-kadang indikator (fenol merah). Inti dari indikator ini adalah mendeteksi virus dengan mengubah warnanya. Selama kehidupan sel, pH berubah ke sisi asam. Dalam lingkungan asam, warna indikator berubah dari merah tua menjadi kuning. Serum darah normal terkadang ditambahkan ke media nutrisi dalam jumlah 100 persen dari volume media nutrisi. Serum darah disebut faktor pertumbuhan. Itu ditambahkan untuk proliferasi sel, hanya di media pertumbuhan . Berdasarkan tujuan penggunaan: media pertumbuhan - termasuk serum; mendukung – tanpa serum. Larutan garam seimbang: semuanya merupakan turunan dari larutan garam. Digunakan sebagai dasar untuk menyiapkan media lubang dan untuk semua manipulasi dengan kultur sel (untuk mencuci sesuatu). Ini adalah solusi Hanks dan Earle. Solusi pendispersi: untuk memisahkan sel dari sel lain dan sel dari kaca. Solusi pepsin, trypsin. Dari kaca - solusi versine. Larutan versine mengikat kation kalsium.

50. Titer virus. Titer virus adalah jumlah virus, yaitu dosis per satuan volume bahan yang mengandung virus. 3 metode titrasi: 1 metode: titrasi virus menurut efek infeksi virus dengan efek yang dinilai secara statistik. Menurut metode baca dan menchu ​​atau menurut Kerber. Titer dinyatakan dalam dosis 50%. Ini ED50. Untuk metode titrasi ini, model biologis apa pun dapat digunakan, namun model ini harus peka terhadap virus yang dititrasi (kultur sel, embrio, hewan laboratorium). Menurut efek penularan dari model biologis yang terinfeksi, model tersebut dibagi menjadi berikut: diakui secara klinis; menurut perubahan patomorfologi; setelah kematian model; oleh akumulasi hemagglutinin. Hasil kerjanya tergantung pada dosis virus. Telah ditetapkan bahwa dosis virus yang menyebabkan 50 persen efek infeksi adalah dosis yang paling tidak rentan terhadap fluktuasi dan merupakan dosis yang paling dapat ditentukan dari semua dosis yang memungkinkan. Titer dinyatakan dalam dosis efektif 50 persen. Ini adalah ED 50. Tergantung pada model biologis yang digunakan dan efek yang diperoleh, dosis 50 persen dapat dinyatakan dalam satuan berikut: LD 50 – Ini adalah 50 persen dari dosis mematikan yang diterima di laboratorium, yang masih hidup dalam hal efek mematikannya. tanda pengenal 50– ini adalah 50 persen dosis infeksi yang ditentukan agar laboratorium dapat hidup berdasarkan tanda-tanda klinis atau perubahan patomorfologi. ELD 50– ini adalah 50 persen dosis mematikan embrio yang ditentukan pada embrio ayam berdasarkan tahun hasilnya. Idul Fitri 50– ini adalah 50 persen dosis infeksi embrionik yang ditentukan pada embrio ayam melalui perubahan patomorfologi dan akumulasi hemaglutinin. TsPD 50– ini adalah dosis sitopatogenik 50 persen yang ditentukan dalam kultur sel oleh CPD. Jika pada sistem yang terinfeksi kita tidak mengamati 50 persen efek ID 50, maka titer dihitung dengan membaca dan menu: lg LD 50 = lg ECD - (% tahun ECD - 50%) / (% tahun ECD - % tahun ECD) SEMUA INI DIKALIKAN DENGAN lg faktor pengenceran. Metode 2 : tentang dampak infeksi virus dengan penilaian efek tunggal. Dengan metode pembentukan plak dalam kultur sel, terdapat efek tunggal. Dinyatakan dalam unit pembentuk cacar atau unit pembentuk plak PFU. Siapkan pengenceran virus 10 kali lipat; pilih model biologis yang sensitif; Dalam setiap pengenceran virus, minimal 4 embrio terinfeksi. Titer dihitung dengan rumus T=a dibagi V*n. a - jumlah rata-rata bopeng atau plak. V adalah volume isi materi = 0,2. n adalah derajat pengenceran virus. Metode 3: sesuai dengan efek hemaglutinasi virus di GAEN. Mereka menempatkan RGA.

38. Prinsip diagnosis laboratorium infeksi virus.

Pemeriksaan laboratorium memainkan peran penting dalam menegakkan diagnosis penyakit menular, meresepkan terapi etiotropik, dan memantau efektivitas pengobatan. Proses diagnostik laboratorium spesifik didasarkan pada identifikasi patogen dan respon tubuh manusia selama proses infeksi. Terdiri dari tiga tahap: pengumpulan bahan, pengangkutan (pacu No. 39), dan studi di laboratorium: 1) Metode virologi meliputi dua tahap utama: isolasi virus dan identifikasinya. Untuk mengisolasi virus, kultur sel, embrio ayam, dan terkadang hewan laboratorium digunakan. Kehadiran virus dalam kultur yang terinfeksi ditentukan oleh perkembangan degenerasi sel tertentu, yaitu efek sitopatogenik, deteksi inklusi intraseluler, serta berdasarkan deteksi antigen spesifik melalui imunofluoresensi, reaksi hemadsorpsi positif dan hemaglutinasi. Virus diidentifikasi menggunakan metode imunologi: reaksi penghambatan hemaglutinasi, fiksasi komplemen, netralisasi, pengendapan gel, imunofluoresensi. 2) Reaksi serologis; 3) Metode imunologi (bioassay); 4) ELISA dan PCR. Setelah menerima hasil pemeriksaan dan mempertimbangkan data epidemiologi dan klinis, diagnosis akhir ditegakkan.

39. Pengambilan, penyiapan dan penerusan Paten. Bahan untuk ahli virologi. Riset.

Pengumpulan, pengangkutan dan pemeriksaan Pat. materinya diatur dengan peraturan perundang-undangan kedokteran hewan. Saat mengambil, tropisme virus diperhitungkan - lokalisasi virus yang disukai pada penyakit tertentu, dan patogenesisnya. Saatnya mengambil jalan buntu. materi sampai akhir penelitiannya - 2-4 jam. Jika Anda membutuhkan lebih banyak waktu, pertahankan (metode kimia - larutan gliserol 50%, pembekuan fisik), tetapi tidak untuk luminist. mikroskopi. Transportasi ke khusus wadah dengan pendampingnya dokumen dan kurir. Persiapan melibatkan ekstraksi virus dari sel. Cairan bahan – filtrasi dan sentrifugasi. Untuk membersihkan bakteri – bakteri. filter dan antibiotik (500-2000 unit per 1 ml), untuk jamur - fungisida (25 unit per 1 ml), diamkan selama 30-40 menit, inokulasi dengan pitata. lingkungan (aerob – MPA, MPB, MPZh, anaerob – Kitta-Tarozzi, jamur – Chapeka, Saburo). Bahan paten padat: 1) ambil bahan paten 1-1,5 g; 2) potong dengan gunting; 3) cuci dengan steril. kaca atau pasir dalam mortar; 4) suspensi 10% dengan larutan Hanks; 5) dibekukan dan dicairkan sebanyak 2 kali; 6)penyaringan melalui saringan kain kasa; 7) sentrifugasi (3000 rpm, 15 menit); 8) cairan supernatan - bahan yang mengandung virus, diuji bakteri (media nutrisi), ditambahkan antibiotik dan fungisida.

40. Metode penelitian mikroskopis di bidang virologi.

1. Mikroskop cahaya: 1) untuk mendeteksi virus cacar (metode perak Morozov); 2) Untuk mendeteksi badan inklusi (ini merupakan akumulasi virion atau dari bagian atau produk reaksi sel terhadap virus; dapat berupa intranuklear dan sitoplasma); 3) deteksi virus CPD (pembulatan, fragmentasi, kematian); 4) deteksi simplas; 5)bekerja dengan C/C; 6) penilaian oleh serolog. reaksi (ELISA, RGAd, RTGAd). 2. Mikroskop pendaran : intinya bila disinari dengan sinar UV, atom-atom tereksitasi, kemudian masuk ke keadaan awal dengan pelepasan energi berupa radiasi cahaya, intensitasnya dinilai dalam tanda silang (hijau zamrud = ++ ++; hijau = ++ +; hijau-kuning = ++; kuning = +; tidak bercahaya = –). Sebelum iradiasi, sediaan dicat dengan fluorokrom (FITC, acredin orange, kuning, rhodamin). Ini adalah fluorokrom sederhana pelapisan. Kompleks - MFA Inti dari MFA itu spesifik. interaksi antibodi dengan serum berlabel fluorokrom (konjugat). 3.Mikroskopi elektron: 1) deteksi virus apa pun; 2) mempelajari ukuran, bentuk, struktur, jenis simetri, reproduksi; 3) mempelajari interaksi virus dengan sel.

LABORATORIUM VIROLOGI- lembaga yang terlibat dalam studi virus dan penyakit virus atau produksi sediaan virus (vaksin, diagnostik, serum kekebalan antivirus, dll.).

V.l. dipisahkan dari bakteriologis dan mulai ada sebagai unit independen pada abad ke-20. Di Uni Soviet, V. l. diciptakan pada tahun 30an. Sekarang ada beberapa lembaga kedokteran di negara ini. virologi, menggabungkan V. l. berbagai profil di mana penyakit virus dipelajari, sifat virus diselidiki, obat virus dikembangkan dan diproduksi (Institut Virologi dinamai D.I. Ivanovsky, Institut Poliomielitis dan Ensefalitis Viral, Institut Penelitian Influenza All-Union, Institut Penelitian Viral Moskow Persiapan, dll). V.l. Ada juga di sebagian besar lembaga mikrobiologi dan epidemiologi Union dan Republican, biasanya diprofilkan dalam kaitannya dengan studi satu atau beberapa penyakit. Selain itu ada sekitar. 150 V.l. di stasiun sanitasi-epidemiologi republik, regional dan kota, serta laboratorium pada umumnya untuk diletakkan. institusi; Mereka terutama melakukan pekerjaan diagnostik. Selain madu V. l., terdapat laboratorium untuk mempelajari infeksi virus pada hewan dan tumbuhan.

Ukuran dan keadaan V. l. tergantung pada tujuan dan ruang lingkup pekerjaan. Dalam semua kasus, sangat penting untuk memastikan keselamatan personel dan kemampuan bekerja dalam kondisi steril.

V.l. terdiri dari laboratorium itu sendiri dan ruang utilitas - untuk memproses dan mensterilkan peralatan, menyiapkan media nutrisi (untuk menumbuhkan kultur sel, mengidentifikasi bakteri dan mikoplasma), virus liofilisasi, inkubator, vivarium, dll. Jika V. l. merupakan bagian dari institusi yang lebih besar (lembaga, pusat sanitasi-epidemiologi, stasiun, dll.), ruang utilitas dapat menjadi milik sejumlah laboratorium atau seluruh institusi.

Sebenarnya V.l. dibangun sebagai laboratorium bakteriologis (lihat), dengan mempertimbangkan kekhasan pekerjaan - menumbuhkan kultur sel dan jaringan, ultrasentrifugasi, menyimpan virus pada suhu rendah, dll. Dilengkapi untuk pekerjaan diagnostik (isolasi virus dan reaksi serologis), untuk mempelajari sifat-sifat virus dan strukturnya, melakukan penelitian genetik, dll.

Kamar V.l. harus mudah dicuci dan dirawat dengan larutan disinfektan. Untuk tujuan ini, dinding dicat dengan cat minyak atau ubin, lantai ditutupi dengan linoleum atau ubin. Ruangan dilengkapi dengan ventilasi suplai dan pembuangan dengan pertukaran udara sekitar 10 kali lipat; itu harus dilengkapi dengan air dingin dan panas, serta gas penerangan. Dianjurkan untuk memiliki sistem udara terkompresi terpusat (tekanan hingga 1,0-1,2 atm) dan vakum (tekanan sisa hingga 700-760 mm Hg). Kamar mandi untuk karyawan harus disediakan. Saat menangani virus yang sangat berbahaya, air limbah perlu dinetralkan (dengan merebus).

Di V.l. Wajib memiliki ruangan tersendiri untuk pekerjaan steril, terdiri dari dua kompartemen yang dipisahkan oleh sekat kaca. Ruang interior - kotak - harus berukuran kecil (6-8 m2), dengan langit-langit rendah (lihat Kotak, mikrobiologis). Pintu harus terbuka ke ruang depan yang digunakan untuk mengenakan pakaian tambahan, dipisahkan oleh sekat kedua dari ruangan lainnya. Untuk mensterilkan kotak dan pra-kotak, digunakan lampu bakterisida yang terbuat dari kaca uviol dengan panjang gelombang dominan 254 nm (lihat Iradiator kuman). Untuk tujuan ini, Anda dapat menggunakan lampu BUV, yang dipasang dengan kecepatan 2-2,5 W per 1 m 3 ruangan; umur lampu rata-rata 1500 jam. Wajib menyediakan udara steril pada kotak melalui ventilasi paksa dengan pertukaran 4-5 kali; Untuk mensterilkan udara dapat digunakan filter LAI K berbahan kain Petryanov - tipe FPP.

Kotak tersebut hanya boleh berisi perkakas dan perkakas yang diperlukan untuk bekerja, alat sterilisasi perkakas, stoples bermulut lebar berisi larutan desinfektan, dan tangki dengan penutup untuk bahan yang terkontaminasi. Saat bekerja dengan patogen infeksi yang sangat berbahaya (cacar, ensefalitis, dll.), kotak meja tambahan dipasang di dalam kotak, di mana udara masuk dan keluar disterilkan dengan penyaringan. Aturan dasar untuk menangani patogen yang sangat berbahaya diatur oleh instruksi khusus.

Untuk desinfeksi di V. l. Lysol 1-5%, kloramin 1-5%, formaldehida 2,5-5% paling sering digunakan.

Selain peralatan gelas bakteriologis biasa, V. l. harus memiliki homogenizer untuk menggiling jaringan, pengaduk magnet, mikroskop (lampu untuk penelitian dalam sinar biasa dan ultraviolet, serta elektronik), sentrifugal dengan berbagai kekuatan (pada 3-5 ribu rpm, dan juga dengan pendinginan pada 12-15 ribu) .dan 60 ribu rpm), memiliki satu set rotor. Termostat diperlukan yang beroperasi secara bersamaan pada suhu yang berbeda (dari 25 hingga 40°), termasuk dengan pasokan karbon dioksida, atau ruangan termostatik. V.l. dilengkapi dengan lemari es atau ruang pendingin dengan t° +4°, -20° dan -40°. Untuk menyimpan kultur sel, diperlukan labu Dewar yang berisi nitrogen cair atau lemari es dengan suhu di bawah -90°.

Laboratorium yang mempelajari biokimia virus dilengkapi seperti laboratorium kimia. Pekerjaan dengan isotop radioaktif dilakukan di ruangan yang dilengkapi peralatan khusus.

Di bagian persiapan media, selain bahan kimia biasa peralatan, perlu adanya instalasi pengolahan air, yang disuling ganda dalam peralatan kaca atau dideionisasi pada kolom dengan resin penukar ion. Untuk mensterilkan larutan yang tidak dapat diautoklaf, gunakan pelat sterilisasi kertas asbes Seitz yang dipasang pada filter tipe Salnikov (F-140, FS-3, FS-7, dll.); penyaringan dilakukan pada tekanan 0,5 atm. Untuk tujuan yang sama, Anda dapat menggunakan pelat kaca (lilin) ​​dan filter Millipore dengan ukuran pori 0,22 hingga 1,2 mikron (lihat Filter Bakteri).

Vivarium (lihat) harus dipisahkan dari bangunan V. l. Itu harus memiliki ruang untuk karantina hewan yang masuk, untuk infeksinya dan secara terpisah untuk otopsi. Pekerjaan dengan hewan laboratorium kecil dilakukan di balik kaca pelindung. Sebaiknya desinfektan kandang hewan sebaiknya menggunakan uap. Krematorium juga diperlukan untuk membakar bangkai hewan dan sampah.

Bibliografi: Kravchenko A. T. Prinsip organisasi dan cara pengoperasian laboratorium virologi dan riketsia, Panduan Laboratorium, diagnosis penyakit virus dan riketsia, ed. P. F. Zdrodovsky dan M. I. Sokolov, hal. 219, M., 1965; Diagnosis laboratorium penyakit virus dan riketsia, ed. E. Lenneth dan N. Schmidt, terjemahan. dari bahasa Inggris, hal. 9, 123, dst., M., 1974; Panduan diagnosis laboratorium penyakit cacar untuk program pemberantasan cacar, Jenewa, WHO, 1969; Virologische Praxis, jam. ay. G.Starke, Jena, 1968, Daftar Pustaka.